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发布时间:2020-07-24 09:49:22

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作者:张钦德

出版社:人民卫生出版社

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中药鉴定技能综合训练

中药鉴定技能综合训练试读:

版权页

图书在版编目( CIP)数据

中药鉴定技能综合训练/张钦德主编.—2版.—北京:人民卫生出版社,2014

ISBN 978-7-117-19545-4

Ⅰ.①中… Ⅱ.①张… Ⅲ.①中药鉴定学-医学院校-教学参考资料 Ⅳ.①R282. 5

中国版本图书馆CIP数据核字( 2014)第227728号人卫社官网 www. pmph. com 出版物查询,在线购书人卫医学网 www. ipmph. com 医学考试辅导,医学数据库服务,医学教育资源,大众健康资讯

版权所有,侵权必究!中药鉴定技能综合训练第2版

主  编:张钦德

出版发行:人民卫生出版社有限公司

     人民卫生电子音像出版社有限公司

地  址:北京市朝阳区潘家园南里19号

邮  编:100021

E - mail:ipmph@pmph.com

制作单位:人民卫生电子音像出版社有限公司

排  版:人民卫生电子音像出版社有限公司

制作时间:2018年1月

版 本 号:V1.0

格  式:mobi

标准书号:ISBN 978-7-117-19545-4/R·19546

策划编辑:李丽

责任编辑:崔长存打击盗版举报电话:010-59787491 E-mail:WQ@pmph.com注:本电子书不包含增值服务内容,如需阅览,可购买正版纸质图书。前 言《中药鉴定技能综合训练》依据国家药品标准、国家职业资格标准、中药专业教学计划与教学大纲编写而成,为国家卫生和计划生育委员会“十二五”规划教材《中药鉴定技术》(第3版)的配套教材。供全国高职高专中药、中药制药技术等专业学生使用。

本实训教材以中药鉴定关键技术为主线,突出实际操作,注重培养学生的职业能力、实践能力、创新能力和综合应用能力。其主要内容包括中药鉴定实训操作基本技能、根及根茎类中药的鉴定、茎木及皮类中药的鉴定、叶类及花类中药的鉴定、果实及种子类中药的鉴定、全草类中药的鉴定等9大模块。共收载实训项目55个,包括认知性参观项目1个,基原鉴定实训项目1个,性状鉴定实训项目9个,显微鉴定实训项目4个,单味中药的综合性鉴定实训项目38个,中成药的鉴定实训项目2个。各院校可根据实际需要和自身教学条件选择使用。附录收载抽验记录及凭证、药品检验原始记录及报告书格式,常用试液、缓冲液、指示剂与指示液、培养基等,供在中药鉴定工作中参考。

本实训教材在编写过程中,得到了人民卫生出版社及各参编院校的大力支持和帮助,借鉴了部分制药企业、药品检验机构及各参编院校的中药鉴定经验及成果,在此一并表示衷心地感谢。

由于编写时间仓促,业务水平有限,不足之处在所难免。希望广大师生在使用过程中提出宝贵意见,以便进一步修订和完善。《中药鉴定技术》编写组2014年8月模块1 中药鉴定实训操作基本技能一、实训目标

本实训目标分为“熟练掌握”和“学会”(或“能”)两个层次。“熟练掌握”系指能正确理解实训原理,独立、正确、规范地完成各项操作,并对实训结果进行准确分析与判断;“学会”(或“能”)系指能够对各种实训项目进行正确操作,对实训结果进行准确判断。通过实训教学,使学生达到下列目标:

1.熟练使用、严格执行国家药品标准;熟练掌握中药鉴定的依据、取样方法及样品前处理技术;熟练掌握中药鉴定的基本操作技能和关键技术,能严格执行岗位标准操作规程和仪器设备标准操作规程。

2.熟练运用性状鉴定技术快速识别常用中药400种以上,并准确描述其性状特征;能运用显微鉴定技术鉴别200种中药,并能绘制显微特征图;能运用理化鉴定技术鉴定90种中药的真伪优劣。

3.学会中药鉴定实训现象的记录与分析、实训结果的计算与判断方法,能正确填写药品检验原始记录及药品检验报告书,确保检验结论准确可靠。

4.具有查阅国家药品标准及相关参考资料、获取和扩展新知识的能力;能科学设计实训方案。

5.能根据中医药理论、药效作用及中药成分的结构与理化性质,确定质量控制的指标成分,建立相应的检验方法,并进行方法学考察和效能指标的评价。

6.树立“质量第一、依法检验”的思想,培养正确操作、仔细观察、认真记录的良好习惯,具有发现问题、提出问题、分析问题和解决问题的能力,养成严谨、认真、一丝不苟和实事求是的科学态度,为今后做好药品质量检验工作打下坚实的基础。二、实训方式

中药鉴定技术实训按场所分为校内实训和校外实训;按实训手段分为性状鉴定实训、显微鉴定实训、理化鉴定实训和综合鉴定实训等。

1.来源鉴定

在来源鉴定实训室、药用植物园、附近山区或中药种植基地进行,充分利用实物、标本、模型、挂图等教具和幻灯、录像、网络及其他教育技术,加强直观教学,引导学生综合运用眼看、手摸、鼻闻、口尝、核对文献、核对标本等步骤鉴定药材的原植物,确定正确的科名、种名及学名,并与《中华人民共和国药典》(简称《中国药典》)规定的来源相对比,判断是否符合规定。

2.性状鉴定

可在教室、实训室、中药标本馆等场所进行。

( 1)教室实训:将普通教室的课桌拼成若干实训台,每台放置同样的药材样品、《中国药典》和放大镜等鉴定用品,学生每3~5人为一组,围绕一个实训台同时做同样的实训内容;固定桌椅的教室可每2人一组,观察同一份药材样品。教师宣布实训任务、目标及要求,可做简要讲解或提示,各组学生查阅《中国药典》对样品进行性状鉴定。教师在各组间巡视,了解并监督各组实训情况,参与学生讨论,随时答疑解惑,针对各组共同疑问进行集中讲解。下课前教师应组织小组内或小组之间的达标测评,教师当堂裁判、点评;布置下一次实训的预习任务。

( 2)实训室实训:将药材检品分成若干组,学生每3~5人为一组,各组学生同时做不同的实训内容。教师宣布实训任务、目标及要求,各组学生按规定程序对样品进行鉴定,并得出鉴定结论,完成检验报告书。一组药材的实训完成后,由组长组织组内相互测评,每人都达标后,再进行下一组药材的实训。教师在各组间巡视,了解并监督各组实训情况,参与学生讨论,随时答疑解惑。有重点地抽查学习态度,并对学习能力较差的学生,进行个别督促和指导。教师及时收阅并检查学生作业,并及时进行反馈指导。

( 3)标本馆实训:学生在课余时间到中药标本馆自行观察样品或标本,温习、巩固课内教学内容,预习即将学习的内容。教师组织并参与实训,随时进行答疑、指导。学生在实训后要完成实训报告,汇报实习内容、收获和体会,并提出问题。教师阅后进行集中讲评或个别指导。

3.显微鉴定

学生在显微鉴定实训室坐定,检查显微镜等实训用品是否完好、齐备。教师宣布实训任务、目标及要求,并作简要的集中讲授;学生按规定程序对样品进行鉴定,并完成检验报告。教师进行巡视指导,随时答疑解惑,可酌情组织必要的讨论。教师下课前收实训报告,课后批阅,下次课讲评。

4.理化鉴定

将学生每2~5人分为一组,每组一套设备和待检样品。教师宣布实训任务、目标及要求,学生按理化鉴定程序对样品进行鉴定,并完成检验报告。教师进行巡视指导,随时答疑解惑,可酌情作简要的集中讲授。

5.现场实训

定期组织学生到药店(房)、医药企业、药检机构或药材市场进行现场实训,学生在实训指导教师及企业兼职教师指导下,参观中药检验现场,参与企业或药检机构中药验收及质检工作,学习实践中药鉴定知识与技能。学生在实训后要完成实训报告,汇报实习内容、收获及体会。教师阅后进行集中讲评或个别指导。三、实训程序与方法

为保证鉴定结果准确、有效,实训时应严格按规定程序(图1- 1)进行,包括实训方案设计、实训准备、取样、供试品溶液的制备、药品检验(包括性状、鉴别、检查、含量测定)、结果判断、检验报告书填写等部分。图1- 1 实训程序

1.实训方案设计

实训前应认真预习实训内容,有针对性地查阅《中国药典》、相关专业资料及网站,设计实训方案,明确实训目标,领会实训原理,了解实训内容和步骤,以便在实训过程中能有条不紊地操作和记录。

2.实训物品准备

确定仪器规格型号,备用;确定实训材料及试药的规格、用量;配制试液,做好记录,贴标签备用。

3.取样

取样系指从整批药品中抽取一部分代表性样品的过程。包括现场抽样和检验用样品的选取。现场抽样是指从整批(件、包)药品中随机抽取一小部分,混合均匀后作为代表整批药品的样本,应保证抽样的覆盖率;检验用样品的选取是指从现场抽取的样品中进一步取出检验用样品的过程,应保证检验用样品的均一性和代表性。将抽取的样品混匀,装入包装袋,做好标识,签封,填写《药品抽样记录及凭证》(附录一),加盖抽验方和被抽验方公章。检验科室收到样品后,采用适宜方法处理至检验用量的3倍,供检验、复核或留样保存用。

4.供试品溶液的制备

中药成分复杂,需制成较纯的供试品溶液才能分析测定。其制备方法是先对样品进行预处理,排除辅料的干扰,再选用适宜的溶剂和方法,将待测成分提取、分离、净化、浓缩。

5.药品检验与复验

( 1)药品检验:应严格按《中国药典》(现行版)和《中国药品检验标准操作规范》规定的项目和方法,进行中药的性状、鉴别、检查和含量测定,并全面分析与判断其是否符合规定。判断某一药品是否合格,应遵循“否定优先”原则,即如果从某一项便能肯定为假药或劣药,那么其他项目即使合格,也应依据能够确证的项目定为假药或劣药。

( 2)药品复验:当事人对药品检验机构的检验结果有异议的,可在收到药品检验结果之日起7日内向原药品检验机构或上一级药品监督管理部门设置或确定的药品检验机构申请复验;亦可直接向国务院药品监督管理部门设置或确定的药品检验机构申请复验。但有以下情况之一者不予复验:①国家药品质量标准中规定不得复验的检验项目;②样品明显不均匀或不够检验需要量的;③已经申请过复验并有复验结论的;④国务院药品监督管理部门规定的其他不宜复验的项目,如重量(或装量)差异、无菌、热原(细菌内毒素) 等;⑤不按规定预先支付复验费用的;⑥收到检验报告书超过7个工作日的。

申请复验单位在申请复验时应当提交以下资料:①加盖申请复验单位公章的“药品复验申请表”(附录二) ;②药品检验机构的药品检验报告书原件;③经办人办理复验申请相关事宜的法人授权书原件;④申请复验单位所在地(食品)药品监督管理局出具的检验报告书收到日期证明。

6.实训记录

学生应备有专用记录本或统一印制的活页记录纸,不得随便将数据记在小纸片或其他地方。实训过程中,应及时、准确地记录实训现象、测量数据及图谱等资料。文字记录应采用蓝黑墨水或碳素笔书写(显微绘图可用铅笔)。凡用微机打印的数据与图谱,应剪贴于记录纸的适宜位置,并有操作者签名;凡用热敏纸打印的数据,为防止日久褪色难以识别,应使用蓝黑墨水或碳素笔将主要数据记录于记录纸上;薄层色谱法可用绘图、复印件或彩照表示。记录数据时,应实事求是,不可随意拼凑数据。若发现数据读错、算错,需要改动时,可将该数据用双横线或单横线划去,并在其上方或旁边写上正确的数据,并签署修改者姓名。实验数据应按有关规定取舍,保留几位有效数字应与所用仪器的准确程度相适应,决不能主观臆断,随意取舍;可疑数据可用Q检验法或Grubbs检验法决定取舍。

药品检验原始记录(附录三至附录十)是出具检验报告书的依据。为保证药品检验工作的科学与规范,检验记录应做到数据真实、资料完整、书写清晰。检验前应注意检品标签与所填检验卡的内容是否相符,逐一查对检品的编号、品名、规格、批号、效期、生产单位、检验目的、收检日期、样品数量和封装情况等,并将检品编号、品名、来源、批号、数量、规格、外观性状、包装情况、实训现象、检验数据等填写在检验记录纸上,在“检验依据”项中,应列出引用标准的名称、版本和页数。

7.实训报告

应包括以下基本内容:①实训名称与日期:写明实训名称及实训日期。②实训目标:写明通过本实训要达到的目的与基本要求。③实训原理:用文字或反应式表述实训基本原理。④实训内容及步骤:简述实训内容与操作步骤。⑤实训结果:定性鉴别应写明是否可检出待测成分;检查项目应写明是否符合规定;定量分析应写明分析数据。⑥实训分析:应对实训中观察到的现象及实训结果进行分析,如实训失败,要查明原因,提出改进方案。⑦药品检验报告书(附录十一) :由表头、检验项目、结论等组成。表头包括报告书编号、检品名称、批号、生产单位或产地、供样单位、检验目的、检验依据、规格、包装、效期、检品数量、收验日期等;检验项目有性状、鉴别、检查和含量测定等内容,每项下再分注小项目,每个检验项目应列出项目名称、标准规定、检验结论等内容。“标准规定”是指药品标准中规定的检验结果或数据,“检验结论”是指实际检验结果或数据。报告书的填写应做到:依据准确,数据无误,结论明确,文字简洁,书写清晰,格式规范,每一张检验报告书只针对一个批号。剩余检品签封留样,按规定条件贮存。一般检品留样保存1年,进口及药厂申报审批质量标准的检品留样保存2年。四、实训考核

实训考核主要采用实操方式进行,要求学生在规定时间内完成规定的操作项目。采用学生自测、互测和教师抽测等方式,根据学生每个实训项目的完成情况予以评定。对不达标者予以提醒和帮助,下次课检查其进步与否。实训考核分为课堂技术测评、单元技术测评、结业技术考核三级考核。各课堂技术测评合格后方可进行单元技术测评,各单元技术测评合格后方可进行结业技术考核,各结业技术考核合格后方可参加顶岗实习。

1.课堂技术测评

每堂实训课都进行课堂技术测评。采用学生自评、互评和教师抽评或全评的方式,检查当堂实训项目的完成情况并予评定。

( 1)学生自评、组内互评、教师抽评:在实训室分组实训,各组学生同时做不同药材实训时,要求学生每做完一组药材的实训,都要做相关练习题,进行自我测评;同一小组的学生由组长组织相互测评;每人都达标后,再进行下一组药材的实训。教师有重点地抽评学习态度,对学习能力较差的学生,进行个别督促和指导。性状鉴定要求学生口答;显微鉴定实训课应当堂交实训报告,教师课后进行检查评定。对不达标者予以提醒和帮助,下次课检查其进步与否。

( 2)学习小组之间互评:在教室实训,各组学生同时做同一组药材的实训时,教师可组织学习小组之间交叉测评,教师当堂裁判、点评。

( 3)教师全评:在实训后收回全部学生的实训自测题,教师一一评阅,再发还给学生,并对全体学生进行综合讲评。

2.单元技术测评

每学完一个单元测评一次,要求学生在规定时间内准确鉴定本单元所学全部中药。

3.结业技术考核

包括性状、显微、理化及综合鉴定三项技术考核。性状鉴定技术考核要求在规定时间内准确鉴定400种以上中药;显微鉴定技术考核要求在规定时间内准确鉴定120种以上中药或混合粉末;理化鉴定技术考核要求在规定时间内准确鉴定90种以上中药;综合鉴定技术考核要求在规定时间内对中药检品进行全面鉴定,并得出检品是否符合规定的结论。学生随机抽取检品,按中药鉴定技能实训考核项目及标准要求,在规定时间内独立完成规定的实训操作(附录十二)。每个实训项目都要求100%达标。有一项不达标者必须补考至达标,否则不能参加顶岗实习。五、实训室规则

1.实训前应认真预习与实训相关的内容,仔细查阅国家药品标准、相关专业资料与网站,科学设计实训方案,明确实训目标、内容、步骤和关键操作技术,明确仪器工作原理、操作方法及注意事项,并能回答教师的提问。应先写好实训报告的部分内容,查好有关数据,以便实训过程中能及时准确地记录、分析,并进行数据处理。

2.学生应带好实训指导书和有关实验用品,提前10分钟进入实训室,按规定的座位入座。进入实训室应穿戴隔离衣帽,严格遵守实训室规则,服从带教老师的指导。严禁在实训室内会客、抽烟、吃零食、喧哗、随意走动、随地吐痰或乱扔杂物,保持实训室的良好秩序。要认真检查仪器、药品等实验用品是否齐备完好,如有缺损应及时报告实训指导教师。

3.实训开始前,应认真听取教师讲解,做好必要的记录;实训过程中,应仔细观察实训现象,及时、准确地记录有关现象及数据,实训记录不得后补或随意涂改。要善于思考,学会运用所学知识分析实训现象,解决实训中的问题。要认真写好实训报告,做到清楚、简练、整洁。

4.应保持实训室整洁,爱护公物,注意节水、节电、节约实训材料及试剂;仪器设备必须轻拿轻放;水、电、气一经用完应立即关闭;停水时,勿忘关闭水龙头;用过的纸片、火柴杆、残渣等物品应放入垃圾桶中,不可扔进水池,以免堵塞下水道。

5.实训中要严格执行标准操作规程,熟悉所用仪器设备的性能及维护知识,杜绝违章操作。未经许可,不得擅自动用仪器设备,更不得乱动与本实训无关的仪器设备。使用精密仪器需经带教老师批准,并在熟悉其性能和操作方法后,按仪器使用说明书规范操作,使用完毕要进行登记。在使用不熟悉其性能的仪器和药品前,应查阅有关资料或请教老师,不可随意进行实训,以免损坏仪器,浪费试剂,导致实训失败,甚至发生意外事故。实训中出现仪器损坏或其他异常时,应立即断电并终止实验,经检查处理并排除故障后,方可继续进行实验。

6.凡属易燃易爆、有毒或易产生有害气体的危险物品,应限量领用,严格管理;剧毒物品应执行“双人双锁”保管制度;操作室内不宜贮存大量危险物品及剧毒试剂。

7.实训结束后,应按规定把实训用品和试剂放回原处,摆放整齐;玻璃仪器应清洗干净;用过的有机溶剂应倒入回收瓶,蒸馏回收再利用;有毒、有腐蚀性的废液应倒入废液缸中。值日生应做好安全检查及清洁卫生工作,关好水、电、门、窗等。

8.实训产生的废液多具有腐蚀性和毒性,不宜直接排放于下水管道,应统一收集,并有效处理后再排放;废液应分类盛装,禁止混合贮存,以免发生剧烈化学反应而造成事故;粘附有害物质的滤纸、称量纸、药棉等应与生活垃圾分开,单独处理。六、实训安全操作规程

应牢固树立“安全第一,预防为主”的思想,注意防火、防爆、防触电、防中毒、防腐蚀等,确保人身与财产安全。

1.防火

火灾的发生,常因操作人员疏忽所致,实训时应注意以下几点:

( 1)应熟练掌握灭火器材的使用方法,妥善保管、定点存放、定期检查、及时更换失效器材;实训室内严禁抽烟,火种要当场熄灭;实训室内限量存放并保管好易燃物品,实训用的升汞、氰化物、酸、碱、胺、醚、醇、醛类化合物等具有毒性、腐蚀性及易爆易燃性,要定人、定点分类保管、限量发放,指定专人领用,严格领用审批、登记制度;禁止将非实验用的油漆、香蕉水、汽油等易燃易爆品带入实训室;使用性质不明或未知的物料,应先做小试验,从最小量开始,同时采取安全措施,做好灭火防爆准备。

( 2)灼热的坩埚、磁盘或燃烧管等高温物体,要放在不易起火处;使用电烙铁,要放在隔热支架上,周围不应堆放可燃物,用后立即拔下电源插头;切勿用电炉或电烘箱烘烤易燃物品及可放出易燃蒸气的物料,其周围不可放置易燃物及挥发性易燃液体。

( 3)加热易燃性有机溶剂时,应在恒温水浴锅或严密的电热板上缓慢进行,严禁用明火或电炉直接加热;蒸馏可燃性物质时,首先应将水充入冷凝器内,并确保水流顺畅后,再开始加热,应时刻注视仪器和冷凝器的正常工作,如需往蒸馏器内补充液体,应先停止加热,放冷后再进行;使用或倾倒易燃液体时,应远离明火,保持通风良好;开启盛装易燃液体的容器塞或盖时,切忌用火加热或贸然敲打;易燃废液应设置专用贮器收集,不得倒入下水道,以免引起火灾;倾倒易燃液体量大时要有防静电措施;手上或身上沾有易燃物时,应立即清洗干净,不得靠近火源,以防着火。

( 4)使用酒精灯时,酒精装量不应超过容量的2/3,且不少于其容量的1/3,酒精不足时,应熄灭酒精灯片刻后再添加酒精;燃着的灯焰应用灯帽盖灭,不得用嘴吹灭;勿用另一正燃着的酒精灯来点燃酒精灯,以防失火。

( 5)实训室一旦出现火灾时,应沉着冷静,选择适宜方法灭火。常用的灭火剂有水、沙、二氧化碳灭火器、四氯化碳灭火器、泡沫灭火器和干粉灭火器等。金属钠、钾、镁、铝粉,电石、过氧化钠着火,应用干沙灭火;汽油、苯、丙酮等比水轻的易燃液体着火,应用泡沫灭火器灭火;有灼烧的金属或熔融物的地方着火,应用干沙或干粉灭火器灭火;电线起火,应立即切断电源,用沙或二氧化碳、四氯化碳灭火器灭火,禁止用水或泡沫灭火器等导电液体灭火。火势猛烈时,要拨打报警电话并设法逃生。

2.防爆

可燃气体与空气混合,当二者比例达到爆炸极限时,受到热源(如电火花)的诱发,就会引起爆炸。应严格遵守以下规程,避免爆炸事故的发生。

( 1)使用可燃性气体时,要防止气体逸出,保持室内通风良好;实训室嗅有煤气味,应立即开窗通风,不可打开任何电源,以免电火花引起煤气爆炸燃烧;操作大量可燃性气体时,严禁同时使用明火,并防止发生电火花及其他撞击火花。

( 2)使用真空装置的玻璃器皿前,应做安全检查,必要时设置压力调节阀或安全阀;进行减压蒸馏时,应采用克氏蒸馏瓶蒸馏、圆底烧瓶接收,不得用平底烧瓶蒸馏或用锥形瓶接收。这是因为烧瓶的坚固性次序为:圆底烧瓶>平底烧瓶>锥形瓶。

( 3)使用高压气瓶或有爆炸危险性的高压设备时,应严格遵守安全操作规程,必要时设专室操作;使用含易燃液体的仪器,应采取必要的防火、防爆措施,设置泄压阀或其他压力释放保护装置,如遇管路发生故障,可及时将高压下的易燃液体排出设备体系,并由废液接收器承接,以避免产生爆炸事故;仪器台数较多时,应设专室操作,室内结构应符合防火、防爆安全要求。

( 4)发热设备应采取必要的散热措施,以免引起事故;易产生可燃气体或蒸气的设备,应在其进、出口处安装阻火器,室内应加强通风,以使爆炸物浓度低于爆炸下限值,若气体有毒(如氨、硫化氢),则应控制在最大容许浓度以下;若设备内部充满易爆物,应采用正压操作,并设置压力报警器,不使外部空气进入,正压消失时,可自动报警;有爆炸危险性的设备(如带易燃溶剂的球磨机),可使用抑爆剂,或在设备(或管道系统)内设置防爆膜和泄压阀,同时应使用安全罩保护,操作者应酌情使用防护眼镜、防护面罩等个人防护用品,在仪器与操作者之间应酌情设置防护屏;在通风柜内进行爆炸危险性工作时,应在仪器上加设泄压装置,当内部压力达到一定数值时,可首先遭受破坏,将高压气体泄出,以免在仪器炸裂时炸伤人体,泄压装置不得对着操作者。

( 5)使用易燃易爆品时,应随用随领,专人负责;易发生爆炸的操作、高压气体的出气口不准对着人,必要时操作者应戴面罩或使用防护挡板;苦味酸、高氯酸、高氯酸盐、过氧化氢以及高压气体等爆炸类药品,应置于低温处保管,不得与其他易燃物同放,移动或起用时不得剧烈振动;要特别加强对氧气瓶、高压消毒锅等的管理,使用时不得离开;室内若有氢气、煤气等易燃易爆气体,应避免产生电火花;继电器工作和开关电闸时,易产生电火花,要特别小心;电器接触点(如电插头)接触不良时,应及时修理或更换。

3.防触电“触电”系指电流通过人体,致人全身发麻、抽动、烧伤,重则死亡。应认真学习安全用电知识,提高防范触电的能力,避免触电事故的发生。

( 1)实训开始应先连接好电路再接通电源,实训结束应先切断电源再拆线路;不用质量低劣、破旧损坏的电线和电器设备;配电盘、开关、插座等要完好无损,老化、损坏的要及时修理或更换;不用试电笔触试高压电;不用手或铁丝、钉子等导电物触试电源插座内部;不用湿布或湿手接触电器、开关等;移动电器设备时,应先断电再移动。

( 2)电器设备应有保护接零和保护接地装置;根据线路安全载流量配置设备和导线,不任意增加负荷,防止过流发热而引起短路、漏电;更换线路保险丝时不要随意加大规格,更不要用其他金属丝代替;修理、安装或移动电器设备时,应先切断电源,在醒目位置悬挂安全标示牌;电器使用完毕后应拔掉电源插头,插拔电源插头时不要用力拉拽电线,以防电线绝缘层受损造成触电;电线的绝缘皮剥落,应及时更换新线或用绝缘胶布包好。

( 3)发生电器火灾时,应立即切断电源,用黄砂、二氧化碳灭火器灭火,切不可用水或泡沫灭火器。若有人触电,要及时切断电源,并用干燥的木棍、竹竿等挑开触电者身上的电线或将触电者与带电的电器分开,不可用手直接救人,以免造成新的触电;若触电者呼吸与心跳已停,应及时拨打急救电话,并迅速将其移至通风良好的地方,使呼吸道通畅,进行人工呼吸及胸外心脏按压;触电者易出现“假死”现象,不应轻易放弃抢救。

4.防中毒

毒物主要通过皮肤、消化道和呼吸道三种途径进入人体,引起中毒。应采取以下措施,加强个人防护,防止中毒事故的发生。

( 1)制定并严格遵守剧毒药品保管、使用制度,设专柜加锁;实训前,应了解所用药品的毒性及防护措施。可能产生毒性气体的实验应在抽毒罩或通风橱内进行,头面部应在通风橱外,必要时佩戴防毒面具,以免中毒。通风橱要保证通风良好,实训前要提前开启,实训结束后仍要开动15分钟后方可关闭。

( 2)不宜在实训室内喝水、吃零食,以防毒物污染;实训中使用过毒性物质应仔细洗手和漱口;不可随意口尝鉴定试剂和未知物;如须以鼻鉴别试剂时,应将试剂瓶远离鼻子,以手轻轻扇动,稍闻即可;用移液管吸取有毒样品时应用吸耳球操作不得用嘴;苯、四氯化碳、乙醚、硝基苯等的蒸气会引起中毒,应在通风良好的情况下使用;苯、汞等药品能透过皮肤进入人体,应避免与皮肤接触。

( 3)微生物限度检查实训操作过程需戴乳胶手套;致病菌种不得随意丢弃;盛装或污染有害病菌的器皿应在消毒或高压灭菌后再利用。如出现菌种管打翻等意外,应立即用消毒剂清洁桌面并洗手,及时杀灭细菌和病毒,避免污染面扩大。

5.防腐蚀

稀释浓硫酸时,应将浓硫酸缓缓倒入水中,并不断搅拌均匀;用浓酸溶解样品时,应在通风橱中操作;有腐蚀性的浓酸、浓碱等,切勿溅在皮肤和衣服上;浓酸溅在皮肤上,应先以大量水冲洗,再用2%碳酸钠溶液或肥皂液中和洗涤;浓碱溅在皮肤上,应先以大量水冲洗,再用4. 5%醋酸或1. 5%盐酸中和洗涤。在室温高的情况下打开装有易挥发试剂的瓶子时,应先将试剂瓶在冷水里浸一段时间,以免启开时大量气液冲出,引起伤害事故;安装玻璃管时,应戴手套或用手巾垫着操作,避免割伤;加热液体时,不能将试管口对着人,以免烫伤。实训1 参观中药质检部门【实训目标】

体验中药质检工作氛围,了解中药质检工作的职能与程序;树立“质量第一、依法检验”的思想,激发学习积极性。【实训内容及步骤】

由药检机构或医药企业质检部门的兼职老师为学生讲述中药质检工作的性质、职能、内容及工作过程;带领学生参观中药质检工作场所及具体操作过程,加深对本门课程的理解和认识。科室主任或工作人员为学生介绍该科室的工作情况,介绍并演示各种仪器设备的性能及使用方法,使学生对各仪器的结构与功能有进一步的了解。【实训报告与考核】

写出参观体会。内容应包括:参观感受,对本课程的认识以及对今后工作的设想等。实训2 中药的来源鉴定技术【实训目标】

通过标本和实地考察,运用植物形态学和分类学知识,对中药的来源进行鉴定,确定正确的种名及拉丁学名,以保证中药品种的准确性。【实训材料】

市售薄荷、泽兰、金银花、石斛等。【实训内容及步骤】

1.植物形态的观察

( 1)对具有较完整的植物类中药检品,应注意对植物体各器官的观察,特别应仔细观察花、果实、孢子囊、子实体等繁殖器官。

( 2)对于干缩破碎的药材,可用热水浸泡软化,展平后再观察。

( 3)观察毛茸、腺点、雄蕊等微小特征时,可借助放大镜或解剖镜观察。

( 4)在实际工作中常遇到不完整的检品,除少数鉴别特征十分突出的特征外,一般要追踪其原植物,包括深入产地调查,以便进一步鉴定。

2.核对文献

( 1)通过对原植物形态的观察,能初步确定科、属的,可直接查阅有关科属的资料;不能确定科、属的,可查阅植物分类检索表。

( 2)对于某些未知品种,鉴定特征不全或缺少有关资料者,也可根据产地、别名、化学成分、功效等线索,直接查阅与中药鉴定、药用植物等相关的综合性书籍或图谱,将检品的特征与书籍中记载的内容相比较,并加以分析。

( 3)在核对文献时,首先应查阅植物分类方面的著作,如《中国植物志》、《中国高等植物》、《新华本草纲要》、《中国中药资源丛书》及有关的地区性植物志等;其次应查阅有关中药品种方面的著作,如《中药志》、《全国中草药汇编》、《中药大辞典》等;必要时,须查对原始文献,以便正确鉴定。原始文献是指第一次发现该种(新种)植物的植物工作者,描述其特征,予以初次定名的文献。

3.核对标本

( 1)当未知种的科、属或种初步确定后,可到有关植物标本室即与已定学名的相关标本(如蜡叶标本、浸液标本等)进行核对。

( 2)要使鉴定结果准确,标本的鉴定必须正确可靠。同时,应注意同种植物不同产地或不同生长期的形态差异。

( 3)必要时核对模式标本(发表新种时所被描述的植物标本),或请有关专家协助鉴定。【实训提示】

为保证鉴定结果准确,应核对较多的标本;观察原植物或标本时,应耐心细致,特别是对药用部位的观察。【实训报告与考核】

通过来源鉴定,确定待检中药的科名、种名及拉丁学名。实训3 中药的性状鉴定技术【实训目标】

熟练掌握中药性状鉴定技术,能正确描述药材性状特征。【实训材料】

海马、三七、黄连(味连)、白术、车前子、玄参、茜草、黄芩、雷丸、绵马贯众、王不留行、天冬、白芥子、海桐皮、川木香、党参、蕲蛇、知母、金银花、黄芪、知母、甘草、南沙参、山药、石斛、当归、郁金、桑枝、茅苍术、杜仲、黄柏、苦楝皮、厚朴、防己、苍术、大黄、何首乌、阿魏、海藻、鱼腥草、薄荷、芦荟、白鲜皮、芒硝、番红花、苏木、小通草、葶苈子、秦皮、降香、血竭、海金沙、天竺黄、牛黄等。【实训内容及步骤】

1.形状

观察并描述下列药材的形状,并理解相关术语的含义:海马—马头、蛇尾、瓦楞身,款冬花—火炬头,三七—猴头,味连—鸡爪形,白术—拳形,乌梢蛇—剑脊状。

2.大小

测量海马、三七、味连、白术、车前子的大小。

3.色泽

观察并描述下列药材表面及断面色泽:玄参,茜草,黄连,黄芩,雷丸,绵马贯众,王不留行,天冬。

4.表面特征

观察并描述下列药材的表面特征,并理解相关术语的含义:白芥子—光滑,紫苏子—网状纹理,海桐皮—钉刺,川木香—油头,党参—狮子盘头,蕲蛇—翘鼻头、方胜纹、念珠斑、佛指甲,知母—金包头,金银花—毛茸,防风—蚯蚓头。

5.质地

观察并描述下列药材的质地,并理解相关术语的含义:黄芪—坚韧,南沙参—疏松,知母—黏性,甘草、山药—粉性,南沙参—松泡,石斛—黏性,当归—油润,郁金—角质,桑枝—柴性。

6.断面

①观察并描述下列药材的折断面,并理解相关术语的含义:茅苍术—起霜,甘草—粉尘散落,杜仲—胶丝相连,黄柏—纤维性,苦楝皮—裂片状分层,厚朴—亮星;②观察并描述下列药材的横切面,并理解相关术语的含义:甘草—菊花心,防己—车轮纹,苍术—油点或朱砂点,大黄—星点,何首乌—云锦花纹,黄芪—金心玉栏。

7.气

嗅闻并描述下列药材的气:阿魏,海藻,鱼腥草,薄荷,芦荟,白鲜皮。

8.味

口尝并描述下列药材的味:味连,白术,玄参,黄芩,川木香,党参,甘草,当归,厚朴,苍术。

9.水试

观察并记录下列药材的水试结果:将芒硝、番红花、秦皮、小通草、葶苈子、车前子加水浸泡;将苏木投入热水中。

10.火试

观察并记录下列药材的火试结果:降香,琥珀,血竭,海金沙。

11.其他

观察并记录天竺黄舌舔后的现象;牛黄加清水调和,涂于指甲上的现象。【实训提示】

1.为保证鉴定结果准确,应核对标准药材或相关药材标本。

2.药材的颜色若为复合色调,描述时,以后一种色调为主;如果所描述的药材具有两种不同的颜色,一般将常见的或质量好的颜色写在前面,少见的或质量差的颜色写在后面,用“或”连接;若药材的颜色变化在一定的范围内时,可将两种颜色用“至”连接。

3.色泽描述应避免用各地理解不同的术语,如“青色”、“土黄色”、“粉白色”等。

4.药材的气不强烈时,可将其破碎、折断或揉搓后再闻;或置于有盖的杯子里,用热水湿润或浸泡后再闻。

5.尝药时要注意取样的代表性,药材的部位不同,味道可能不同,如皮部与木部、果皮与种子等各部位的气味常有区别。

6.舌的不同部位对味觉的敏感程度不同,舌尖对甜味较敏感,舌两侧对酸味敏感,舌根部对苦味敏感。因此,口尝时,要取少量有代表性的样品,咀嚼至少1分钟,使舌的各部位都充分与药液接触,这样才能准确地尝到药味。【实训报告与考核】

试描述三七、味连、白术、玄参、黄芩、天冬、党参、蕲蛇、知母、金银花、黄芪、知母、甘草、当归、郁金、桑枝、黄柏、厚朴、防己、苍术、大黄、何首乌、阿魏、海藻、鱼腥草、薄荷的形状特征。实训4 中药的组织制片与绘图【实训目标】

熟练掌握中药的徒手制片法和表面制片法;学会中药的组织简图及详图绘制技术。【实训准备】

1.实训器具

徒手切片器、生物显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、解剖针、擦镜纸、吸水纸、玻璃棒、培养皿、毛笔、单面刀片、火柴、酒精灯、纱布、离心管、恒温水浴锅等。

2.实训材料

小通草药材、薄荷茎、牛膝根、松花粉、海金沙、蒲黄、大青叶、五味子等。

3.实训试剂 稀甘油、甘油醋酸试液、水合氯醛试液、间苯三酚试液、浓盐酸、乙醇、蒸馏水、醋酐、硫酸、50%甘油、1%苯酚、品红甘油胶等。

品红甘油胶制法:取明胶1g,加水6ml,浸泡至溶化,再加甘油7ml,加热并轻轻搅拌至完全混匀,用纱布过滤至培养皿中,加碱性品红溶液(碱性品红0. 1g,加无水乙醇600ml及樟油80ml,溶解)适量,混匀,凝固后即得。【实训内容及步骤】(一)徒手制片法

采用徒手制片法制作药材的横切片或纵切片,操作简便、迅速,制成的切片能保持其细胞内含物的固有形态,便于进行各种显微化学反应。

1.药材的预处理

( 1)切块或段:先将需观察的部位,切成适当大小的块或段,一般以宽1cm、长3cm为宜。

( 2)软硬度调整:软硬适中的药材可直接进行切片;质地坚硬的药材可放在吸湿器(即玻璃干燥器底部盛蒸馏水并滴数滴苯酚防霉,上部瓷板上放置药材吸湿)中闷润,或在水中浸泡或略煮,使其软化后再切片;过于柔软的材料,可将其浸入70%~95%乙醇溶液中,约20分钟变硬后再切片。

( 3)支持物选择:对于细小的种子或柔软而薄的叶类药材,不便直接手持切片,可选用适宜的支持物进行切片。如细小的种子类药材可放在软木塞或橡皮片中(一侧切一窄缝,将种子嵌入其中)进行切片;叶类药材可夹持在质地松软的小通草中进行切片。

2.切片

选取已软化的药材,用左手拇指和食指夹持材料,中指托住药材底部,使药材略高出食、拇二指;用右手持刀片,自左向右移动手腕,动作要轻而快,力求切片薄而完整,操作时材料的断面与刀口需常用水或50%乙醇溶液湿润。

3.装片

将切好的薄片,用毛笔小心地移入盛有清水或50%乙醇溶液的培养皿中浸泡,取载玻片滴加稀甘油或其他试液,用镊子或毛笔将切片移于其上,再滴加稀甘油,盖片镜检;也可将薄片滴加水合氯醛液加热透化,再滴加稀甘油,盖片镜检。加盖玻片时,应尽量避免产生气泡。(二)表面制片法

将供试品(大青叶、五味子)湿润软化后,剪取欲观察部位约24mm,一正一反置载玻片上,或撕取叶片、萼片、花冠、果皮、种皮制成表面片,加适宜试液,或加热透化后以稀甘油装片观察。(三)花粉粒与孢子制片

取松花粉、海金沙及蒲黄(干燥供试品可浸于冰醋酸中软化),用玻璃棒研碎,经纱布过滤至离心管中,离心,取沉淀加新配制的醋酐与硫酸( 9∶1)混合液1~3ml,置水浴上加热2~3分钟,离心,取沉淀,用水洗涤2次,取沉淀少量置载玻片上,滴加水合氯醛试液1~2滴,盖上盖玻片,观察;或加50%甘油与1%苯酚各1~2滴,用品红甘油胶封片观察。(四)组织绘图技术

绘图方法包括徒手绘图、网格绘图、描绘器绘图和投影绘图等方法。重点练习徒手绘制组织简图及详图。要求比例正确,形态逼真,结构清楚,线条及细点粗细均匀,明暗一致。

1.徒手绘图法

选择典型的显微标本片和结构,仔细观察各部位的形状、结构及比例关系,用色淡的铅笔( 2H或4H),按照显微图像的比例关系画出轮廓草图,经反复对照修改后,再用色深的铅笔( HB或2B)绘出修改图。

2.组织简图绘制法

组织简图即用代表符号画成较简明的组织构造图,能清晰地表示出各组织和某些特征排列的位置、分布情况及比例关系,以了解该器官组织构造的全貌。组织简图各部位表示符号如图1- 2所示。图1- 2 组织简图各部位表示符号

绘图步骤:①将组织标本片置于显微镜下观察,用铅笔将图像的各部位轮廓画出。②按照规定的表示符号绘出各部位的重要特征(如厚壁组织、分泌组织、维管束等) ;准确表示组织中各部位的范围、界限及重要特征的所在位置。③将各部位依次向右方引出直线,标上图注,图下注明各部分名称及放大倍数。

3.组织详图绘制法

将显微镜下观察的组织、细胞及其内含物的真实形态、大小等特征,如实地绘制到画面上的图形,称为组织详图。绘图步骤同简图绘制法,应注意薄壁组织用单线条表示,厚壁组织用双线条表示。【实训提示】

1.在药材预处理时应避免影响欲观察的显微特征。如观察菊糖、黏液等特征时,不可与水接触,以免特征溶解消失;观察挥发油、树脂等特征时,则不可与高浓度乙醇或其他有机溶剂接触。

2.用水合氯醛试液透化处理时,加热温度不宜过高,以防水合氯醛试液沸腾,将组织中带入气泡。【实训报告与考核】

绘薄荷茎、牛膝根横切面简图及详图;绘松花粉、海金沙、蒲黄整体形态图;绘大青叶、五味子表面特征图。实训5 中药的粉末制片与绘图【实训目标】

熟练掌握中药粉末标本片的制作方法及注意事项;学会中药粉末特征图的绘制技术。【实训准备】

1.实训器具

显微镜、镊子、解剖针、载玻片、盖玻片、酒精灯等。

2.实训材料

山药粉末、半夏粉末。

3.实训试剂

稀甘油、甘油醋酸试液、水合氯醛试液。【实训内容及步骤】

1.粉末制备

药材应先干燥,磨或锉成细粉,过4号筛,混匀,装瓶,贴上标签。制备粉末时,取样要有代表性,如根要切取根头、根中段及根尾等部位,全部磨成粉,不得丢弃渣头;干燥温度一般不宜超过60℃,以免淀粉粒糊化。

2.制片

用解剖针挑取粉末少许,置载玻片中央偏右的位置,滴加适宜的透明剂1~2滴,搅匀,待液体渗入粉末后,用左手食指与拇指夹持盖玻片边缘,使其左侧与试液左侧接触,再用右手持小镊子或解剖针托住盖玻片的右侧,轻轻下放,使液体逐渐扩延并充满盖玻片下方。若液体未充满盖玻片,应从空隙相对的边缘滴加液体,以防产生气泡;若液体过多,用滤纸吸去溢出的液体,最后在载玻片的左端贴上标签,即可镜检。

需用水合氯醛试液透化时,滴加试液后,手执载玻片一端或用镊子夹持,保持水平置酒精灯火焰上方约1~2cm处加热,微沸后,离开火焰,再滴加水合氯醛试液,放在小火上继续加热,如此反复操作至粉末呈透明状为止,放冷后滴加稀甘油1~2滴,封片镜检。

3.粉末绘图

将粉末标本片置显微镜下观察后,绘出有代表性的细胞、后含物及某些组织碎片特征。绘图时,主要特征绘在画面的中央部位,次要特征绘在图面的边缘部位。单个细胞要求完整,组织碎片可绘全部或典型的一部分。【实训提示】

1.在进行未知粉末装片时,一般先用水、稀甘油或甘油醋酸装片,观察记录后再用水合氯醛冷装或透化装片,最后可滴加其他理化试剂进行显微观察。

2.装片用的液体如易挥发,装片后应立即观察。用水装片也较易蒸发而干涸,滴加少许甘油可延长保存时间。

3.应注意防止标本片产生气泡,干扰观察。用水或稀甘油装片时,先加少量乙醇使其润湿,可避免或减少气泡的形成,或反复将盖玻片沿一侧轻抬,亦可使多数气泡逸出;用水合氯醛试液透化处理时,加热温度不宜过高,以防水合氯醛试液沸腾,使组织中带入气泡;搅拌时产生的气泡可随时用针将其移出;菌类药材一般用蒸馏水装片,若用稀甘油装片,因其渗透性较差,粉末易成团并形成大量气泡。

4.一般需观察2~5个显微标本片,根据能否观察到某药材的专属性特征,判断该特征是否存在。

5.为提高显微鉴别的正确性,可与对照药材或已准确进行品种鉴定的药材对照观察。

6.观察时应采用“先低倍后高倍”的原则,先在低倍镜下采用“之”字移动法,使标本片沿着一定的线路移动,以便能检查到标本片的各个部位。方法是:旋转载物台移动器,从盖玻片的左上角开始逐渐使视野平行向右移动,到达右上角后,将视野向近侧移动2/3~3/4个视野,再使视野由右平行向左移动,到达左端后,再如前法移动,直到整个标本片观察完毕。【实训报告与考核】

绘山药、半夏粉末特征图。实训6 显微测微尺的使用【实训目标】

熟练掌握显微测微尺的标化及使用方法;学会在显微镜下测量物体的大小。【实训准备】

1.实训器具

显微镜、目镜测微尺、物镜测微尺、载玻片、盖玻片等。

2.实训材料

山药(或半夏)粉末、大黄粉末等。

3.实训试剂

稀甘油、甘油醋酸试液、水合氯醛试液。【实训内容及步骤】

显微测量常用的量尺为目镜测微尺与载物台测微尺。图1- 3 目镜测微尺

1.目镜测微尺

简称目尺,为圆形玻璃片,直径18~20mm,中央有一标尺,长约5mm (或10mm),刻有精确等距离的平行线,常为50 (或100)条(图1- 3)。目尺是放在目镜内用以直接测量物体用的标尺,其刻度所代表的长度依显微镜放大倍数不同而改变,故使用前必须用载物台测微尺标化,以确定在使用该显微镜及其特定的物镜、目镜和镜筒长度时,目尺每小格所代表的实际长度。

2.载物台测微尺

简称台尺,为长方形玻璃片,中央有一小圆形玻片,其下封藏一微型标尺,全长1mm (或2mm),上面刻有精确等分为100(或200)小格的细线,每一小格长10μm (图1-4)。台尺是用以标化目镜测微尺的,不能直接测量物体的大小。图1-4 载物台测微尺

3.目镜测微尺的标化

将台尺置于显微镜载物台上,按常规对光调焦,并移动测微尺物象于视野中央;将目尺放入目镜筒中部的光栏上。这时,视野中可同时观察到台尺和目尺的刻度小格,移动台尺和旋转目镜,使二量尺的刻度平行。左边的“0”刻度重合,寻找第二条重合刻度(图1- 5)。记录两刻度的读数,并根据两个量尺左右两条重合线间小格数的比值,计算出目尺每小格在该物镜条件下所相当的长度(μm)。计算公式:图1- 5 视野中目微尺与台微尺的重合线

为减少误差,计算目尺每小格所相当的长度时,可寻找多个重合刻度,记录多组数据,求其平均值。更换显微镜或目镜、物镜时,均须重新标化目微尺每小格所相当的长度。

4.测量方法

目尺标化后,将台尺取下,换上装有药材粉末的显微标本片。对光,调焦,移动标本片,使待测物置于目尺范围内,数出待测物占目尺的小格数,乘以目尺在该条件下每小格相当的长度值,即得。例如:接目镜头为10×,接物镜头为40×时,测得淀粉粒直径占目微尺9小格,则该淀粉粒的直径为3. 8μm×9 =34. 2μm。【实训报告与考核】

测出所用显微镜的高、低倍镜的目尺每小格所代表的长度,并记录;测出山药(或半夏)淀粉粒、大黄草酸钙簇晶的直径及山药(或半夏)草酸钙针晶的长度。实训7 显微摄影技术【实训目标】

熟练掌握显微摄影的基本技能,独立完成显微摄影全过程;初步掌握对照片质量分析的标准。【实训准备】

1.实训器具

显微镜、显微摄影装置、各色滤光镜、黑白或彩色负性胶片、显影罐、温度计、水浴锅或冰块、暗房袋、暗盒、剪子、胶带(橡皮膏)瓷或塑料盘、盆、量筒、烧杯、放大纸、竹夹、上光机。

2.实训材料

人参、牛膝组织永久制片;大黄、山药粉末制片等。

3.实训试剂

稀甘油、甘油醋酸试液、水合氯醛试液、显影液、定影液、停影液等。【实训内容及步骤】(一)显微摄影基本技术训练

1.安装显微摄影装置

将相机、显微镜和照明设备连在一起,并能在观察镜中看到所要拍摄的标本。安装时,需先细读说明书,熟悉仪器结构和功能,连接部位要稳固。

2.调整好显微镜

( 1)聚光器和光源灯的调中:显微摄影通常采用中心亮视野透射照明法,摄影前,要把聚光器和光源灯调中,使聚光器中心与视场光阑的中心处于同一光轴上。光源灯的灯丝照明于视野中心。

聚光器的调中步骤:①转动聚光器升降旋钮使聚光器升至顶点位置。②接通光源灯的电源开关。③将被摄的制片标本,放在载物台上,用4×或10×低倍镜聚焦在样品上。④缩小镜座上的视场光阑,在视野中可见边缘模糊的视场光阑图像。⑤微降聚光器,至视场光阑的图像清晰聚焦止。⑥用聚光器两个调节螺杆推动聚光器,使缩小的视场光阑图像调至视野中心。⑦开放视场光阑,使多角形的周边与视野边缘完全重合。⑧反复缩放视场光阑数次,确认光阑中心和边缘与视野完全重合。⑨使聚光器回复顶点位置。

光源灯调中步骤:在视场光阑上面的滤色镜座上,放一毛玻璃,用以观察灯丝位置,转动光源灯位置,使灯丝位于视场光阑中心,然后固定光源灯。

( 2)正确使用光阑:显微镜有两种可变光阑——孔径光阑和视野光阑。正确的调整和使用光阑是保证摄影质量的重要环节。

1)孔径光阑的调节:孔径光阑与聚光镜是构成聚光器的两个重要部分。显微镜的性能主要决定于物镜的性能,而物镜的性能又决定于数值孔径。物镜的数值孔径与聚光镜的数值孔径相关,两者孔径相等时,物镜分辨力最高。聚光镜的数值孔径受孔径光阑控制,用孔径光阑的开放与收缩,调节聚光镜数值孔径的大小。显微摄影不同于一般摄影,其最大的区别是影像反差小,焦点深度浅。这两点可随孔径光阑缩小而提高。孔径光阑小于物镜的数值孔径时,物象的分辨力和亮度降低,但影像反差和焦点深度提高,使影像更加清晰。所以,在不过多地降低分辨力的前提下,把孔径光阑调到所用物镜数值孔径的60%~70%大小是比较合适的。例如,物镜的数值孔径为1. 0,孔径光阑的数值调到0. 6~0. 7,所以,显微摄影时,缩小孔径光阑,尽管丧失少许的分辨力,却提高了影像反差、焦点深度和影像的清晰度。当聚光器标有孔径的数字时,对准所需的值即妥,如果不具孔径光阑数值,在显微镜向标本聚焦后,从镜筒中取下目镜,在物镜的后透镜中可见孔径光阑影像。光阑缩小时,仅见一亮点,逐渐开大光阑,亮孔扩大,直至需要的程度。当光阑缩小,视野亮度降低时,可适当提高电压增加照明强度。

2)视野光阑的调节:视野光阑位于镜座之中,用以控制照明光束的直径,缩小视野光阑,光束直径小于孔径光阑,视野亮度不足,影像不清晰;视野光阑开大,光束直径超出孔径光阑,因光线过多,造成光线的乱反射,影响影像的清晰度。视野光阑的适宜大小,以光阑的边缘外切孔径或孔径光阑内接视野光阑为度。

孔径光阑的调节,取决于所用物镜数值孔径。当两者相等,分辨力最高;孔径光阑小于物镜的数值孔径,影像反差和焦点深度增大。视野光阑随孔径光阑而变,总是外切孔径光阑。更换物镜,数值孔径改变,孔径光阑重新调整,视野光阑亦随之改变。

3.底片选择

( 1)底片种类:摄影用的底片有硬片(透明玻璃上涂以感光乳剂而成)和软片(胶片与胶卷)。胶卷常用的规格有135和120。

( 2)底片性能

1)底片类型:①彩色底片:反转片和负片,又可分别分为日光型、灯光型和日光灯光两用型。②黑白底片:色盲片、分色片、全色片三种。色盲片为只感受蓝紫和紫外光的底片,适用于黑白、蓝紫色色光影像的摄影,而不能用来拍摄红、绿、黄等色的影像;分色片为能感受蓝紫、黄绿光的底片,除红橙色标本外,可广泛用于显微摄影;全色片:为能感受光谱中全部可见光的底片,对景物明暗层次能较好表现,黑白层次多,反差小。

2)底片感光度:底片对光的敏感程度。感光度单位:①定( DIN)制:每相差三定,感光速度就相差一倍,如21定为18定的二倍,依次类推;②标准制( ASA) :它规定数值增一倍,感光速度也增加一倍,如ASA 100为ASA 50的二倍。21定相当于ASA 100。显微摄影力求使用感光度低的胶片。

( 3)底片的选择和应用:①大型显微摄影机选用硬片,小型显微摄影机选用软片。②小型机相所拍底片需要放大,所以选用银粒细的底片。③显微摄影要求反差大就选中速( 17~19)定和慢速( 14~16)定,甚至特慢速( 9~13)定底片,一般以18定( ASA 50)以下为宜。④色盲片和分色片很适合于显微摄影,特别是显微摄影以分色片最好,全色片也可用于显微摄影,但往往要用适当颜色的滤光片,以增加反差,才能达到良好效果。⑤选用灯光型或日光灯两用型彩色底片拍摄具有色彩的样本。

4.曝光的确定

曝光是显微摄影的一个关键。曝光过度,使底片密度很大,昏暗不清,丧失影纹细节,反差太小。曝光不足,整个底片密度很小,比较透明,虽然最大密度部分影纹分明,但最小密度和灰雾密度一样,没有影纹存在,缺乏正常反差。这类底片,根本不能印放出合格的照片。曝光最重要的问题就是判定曝光时间,确定快门速度。显微摄影的视野,亮度变化极大,曝光时间的变化范围宽广,正确估计曝光时间比普通野外摄影要困难得多。常用的估计影像亮度来确定曝光时间的方法,往往因人眼对光强度的显著变化不会有科学的定量分析而致使发生错误。

( 1)影响曝光的因素:①照明光源:电压高,功率大的灯泡,光强度高,色温高,使胶片感光快,曝光时间要短。②胶片的感光度:感光度高的胶片对光敏感,曝光时间可短一些;胶片超过有效期,或保存

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