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发布时间:2020-08-13 15:27:57

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朱玉贤《现代分子生物学》(第4版)配套题库【名校考研真题+课后习题+章节题库+模拟试题】

朱玉贤《现代分子生物学》(第4版)配套题库【名校考研真题+课后习题+章节题库+模拟试题】试读:

第一部分 名校考研真题

第1章 绪 论

一、选择题

11953年Watson和Crick提出(  )。[扬州大学2018研]

A.DNA是双螺旋结构

B.DNA复制是半保留的

C.三个连续的核苷酸代表一个遗传密码

D.遗传物质通常是DNA而非RNA【答案】A

2下列有关基因的叙述,错误的是(  )。[浙江工业大学2008研]

A.蛋白质是基因表达的唯一产物

B.基因是DNA链上具有编码功能的片断

C.基因也可以是RNA

D.基因突变不一定导致其表达产物改变结构

E.基因具有方向性【答案】A【解析】基因表达的产物是多肽链或功能RNA分子。

3下列各项中,尚未获得诺贝尔奖的是(  )。[中国科学院研究生院2007研]

A.DNA双螺旋模型

B.PCR仪的发明

C.RNA干扰技术

D.抑癌基因的发现【答案】D【解析】A项,1962年,Watson(美)和Crick(英)因为在1953年提出DNA的反向平行双螺旋模型而与Wilkins共获诺贝尔生理学或医学奖。B项,1993年,Mullis由于发明PCR仪而与加拿大学者Smith(第一个设计基因定点突变)共享诺贝尔化学奖。C项,2006年,美国科学家Fire和Mello揭示控制遗传信息流动的机制——RNA干扰而获诺贝尔生理学或医学奖。

4证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是:肺炎球菌在老鼠体内的毒性和T2噬菌体感染大肠杆菌。这两个实验中主要的论点证据是(  )。[南京航空航天大学2007研]

A.从被感染的生物体内重新分离得到DNA作为疾病的致病剂

B.DNA突变导致毒性丧失

C.生物体吸收的外源DNA(而并非蛋白质)改变了其遗传潜能

D.DNA是不能在生物体间转移的,因此它一定是一种非常保守的分子

E.真核生物、原核生物、病毒的DNA能相互混合并彼此替代【答案】C【解析】微生物学家Avery和他的同事发现来自于S型肺炎链球菌的DNA可吸附在无毒的R型肺炎链球菌上,并将其转化为S型肺炎链球菌,如果提取出其DNA并用DNase处理,转化则不会发生。科学家Hershey和他的学生Chase从事的噬菌体侵染细菌的实验中,噬菌体将DNA全部注入细菌细胞内,其蛋白质外壳则留在细胞外面;进入细菌体内的DNA,能利用细菌的物质合成噬菌体自身的DNA和蛋白质,并组装成与亲代完全相同的子代噬菌体。两个实验共同的论点证据即是生物体是由于吸收了DNA,而非其他物质,而改变了其遗传潜能。

二、填空题

1证明DNA是遗传物质的经典实验是Avery的______和Hershey、Chase的______。[深圳大学2008研]【答案】肺炎链球菌在老鼠体内的毒性实验;T2噬菌体感染大肠杆菌实验【解析】肺炎链球菌转化感染小鼠实验,得出转化因子是DNA的结论;Hershey的噬菌体侵染细菌实验,进一步得出DNA是遗传物质的载体的结论。

2发现乳糖操纵子而获得诺贝尔奖的两位科学家是______和______。[宁波大学2008研]【答案】Jacob;Monod【解析】1965年,法国科学家Jacob和Monod由于提出并证实了操纵子(operon)作为调节细菌细胞代谢的分子机制而与Iwoff分享了诺贝尔生理学或医学奖。

3在分子生物学发展史上,两次获得诺贝尔奖的科学家是英国著名的______,他的两项贡献分别是______和______。[中国计量学院2007研]【答案】Sanger;蛋白质序列分析;DNA序列分析法【解析】1980年,Sanger因设计出一种测定DNA分子内核苷酸序列的方法,而与Gilbrt和Berg分获诺贝尔化学奖。此外,Sanger还由于测定了牛胰岛素的一级结构而获得1958年诺贝尔化学奖。

4基因的分子生物学定义是:______。[华中科技大学2005研]【答案】基因是产生一条多肽链或功能RNA分子所必需的全部核苷酸序列。

三、判断题

A. Kornberg因发现DNA合成中负责复制的主酶而获得1959年诺贝尔奖。(  )[中国科学院研究生院2007研]【答案】错【解析】1959年,A. Kornberg实现了DNA分子在细菌细胞和试管内的复制,和S. Ochoa分享了当年的诺贝尔生理学或医学奖,S. Ochoa发现了细菌的多核苷酸磷酸化酶,成功地合成了核糖核酸,研究并重建了将基因内的遗传信息通过RNA中间体翻译成蛋白质的过程。

四、名词解释题

分子生物学[暨南大学2015研]

答:分子生物学是指研究核酸、蛋白质等所有生物大分子的形态、结构特征及其重要性、规律性和相互关系的科学,是人类从分子水平上真正揭开生物世界的奥秘,由被动地适应自然界转向主动地改造和重组自然界的基础学科。分子生物学的主要研究内容包括:重组DNA技术(基因工程),基因表达调控研究,生物大分子的结构功能研究(结构分子生物学),基因组、功能基因组与生物信息学研究。

五、简答题

12013年诺贝尔生理学或医学奖的得主是哪几位?得奖理由?其意义何在?[武汉科技大学2014研]

相关试题:(1)介绍近五年你熟悉的诺贝尔奖重大生物学事件。[华南理工大学2014研](2)论述2013年诺贝尔胜生理与医学奖成果的内容及意义。[河北大学2014研]

答:(1)2013年诺贝尔生理学或医学奖揭晓,美国、德国3位科学家詹姆斯·罗斯曼、兰迪·谢克曼和托马斯·聚德霍夫(James E. Rothman, Randy W. Schekman和Thomas C. Südhof)获奖。(2)获奖理由是“发现细胞内的主要运输系统——囊泡运输的调节机制”。Randy Schekman发现了囊泡传输所需的一组基因;James Rothman阐明了囊泡是如何与目标融合并传递的蛋白质机器;Thomas Südhof则揭示了信号是如何引导囊泡精确释放被运输物的。(3)该系统的发现揭示了细胞生理学的一个基础性过程,揭开了细胞物质运输和投递的精确控制系统的面纱,而该系统的失调会带来有害影响,并可导致诸如神经学疾病、糖尿病和免疫学疾病等的发生。

21952年Hershey和Chase通过噬菌体感染实验证实遗传物质是DNA而不是蛋白质。简述此实验的内容。[上海交通大学2006研]

答:1952年,美国科学家Hershey和Chase通过噬菌体感染细菌的实验证实了遗传物质是DNA而不是蛋白质,其实验的内容具体如下:35

首先用放射性同位素S标记了一部分噬菌体的蛋白质,并用放32射性同位素P标记了另一部分噬菌体的DNA,因为硫只存在于T2噬菌体的蛋白质,99%的磷存在于DNA。然后,用被标记的T2噬菌体分别去侵染细菌,当噬菌体在细菌体内大量增殖时,对被标记物质进行测试(检测放射性)。

测试的结果表明,噬菌体的蛋白质没有进入细菌内部,而是留在细菌的外部,噬菌体的DNA进入了细菌体内,可见,噬菌体在细菌内的增殖是在噬菌体DNA的作用下完成的。

六、论述题

1请你描述两个经典实验来证明遗传物质是DNA而不是蛋白质。[武汉大学2008研]

相关试题:简述证实DNA是遗传信息携带者的两个经典实验设计。[河北大学2017研]

答:证明遗传物质是DNA而不是蛋白质的经典实验是肺炎链球菌转化感染小鼠实验和T2噬菌体侵染细菌实验。具体实验内容如下:(1)肺炎链球菌转化感染小鼠实验

1928年,Griffith发现,将热杀死的S型细菌和活的无毒的R型细菌共同注射到小鼠中,很多小鼠因败血症而死亡,解剖后发现死鼠体内有活的S型细菌存在。1944年,Avery等人进一步利用肺炎链球菌的转化实验,对S型菌株分别进行不同酶降解处理并与R型菌株混合培养,测定菌株从R型转化为S型的能力,结果发现RNA和蛋白质发生降解后其转化能力不受影响,DNA酶处理后则几乎完全丧失转化能力。从而证明了转化因子是DNA。(2)T2噬菌体侵染细菌实验

1952年,Hershey和Chase进行了噬菌体侵染细菌实验:将细菌3532分别在含有S标记的氨基酸和P标记核苷酸的培养基中培养,细菌3532中的子代噬菌体就相应含有S标记的蛋白质和P标记的核酸。分别用这些噬菌体侵染未标记的细菌,经过1~2个噬菌体复制周期后离心检测细菌裂解释放的子代噬菌体放射性(此时噬菌体初期侵染的蛋白质外壳在上清液中,而含有子代噬菌体的菌体在沉淀中),结果发3532现子代噬菌体中几乎不含有S标记的蛋白质,但有30%以上的P标记。由于T2噬菌体中仅含有DNA和蛋白质,因此证明噬菌体传代过程中的遗传物质是DNA而不是蛋白质。

第2章 染色体与DNA

一、选择题

1双链断裂的修复主要采用下列哪一种修复机制是(  )。[扬州大学2018研]

A.同源重组修复

B.核苷酸切除修复

C.碱基切除修复

D.错配修复【答案】A【解析】同源重组和非同源末端连接是DNA双链断裂应答机制中两条重要的修复通路。

2某双链DNA分子中腺嘌呤的含量是15%,则胞嘧啶的含量应为(  )[浙江工业大学2018研]

A.15%

B.30%

C.35%

D.42.5%【答案】C【解析】根据双链DNA分子中,A=T,C=G,A+T+C+G=100%。由题意可知,A=15%,则T=15%,则C=G=(100%-15%-15%)÷2=35%。

3以下哪种组蛋白不属于核小体的核心蛋白?(  )[浙江农林大学2016研]

A.H1

B.HA2

C.HB2

D.H3

E.H4【答案】A【解析】核心由组蛋白(HA、HB、H、H各两分子)八聚体构2234成,1分子H在核小体的外面稳定DNA。1

4真核生物染色体组装的结构层次(从低级到高级)是(  )。[电子科技大学2015研]

A.染色质纤维→核小体→组蛋白八聚体→染色体环

B.核小体→组蛋白八聚体→染色体环→染色质纤维

C.组蛋白八聚体→核小体→染色质纤维→染色体环

D.核小体→组蛋白八聚体→染色质纤维→染色体环【答案】C

5以下哪一项不是维持DNA双螺旋结构的稳定性的因素?(  )[湖南农业大学2012研]

A.碱基对之间的氢键

B.双螺旋内的疏水作用

C.二硫键

D.碱基堆积力【答案】C【解析】ABD三项,DNA双螺旋结构是DNA的二级结构,主要靠氢键、疏水作用和碱基堆积力维持稳定性;C项,二硫键主要是维持蛋白质的稳定性,DNA不含二硫键。

6在一段DNA复制时,序列5′-TAGA-3′合成下列哪种互补结构?(  )[电子科技大学2009研]

A.5′-TCTA-3′

B.5′-ATCT-3′

C.5′-UCUA-3′

D.3′-TCTA-5′【答案】A【解析】DNA两条链的读序方向都是5′→3′。

7假定一负超螺旋的L=20,T=23,W=-3。问大肠杆菌拓扑异构酶Ⅰ作用一次后的L、T、W值分别是多少?(  )[南开大学2009研]

A.L=21 T=23 W=-2

B.L=22 T=23 W=-1

C.L=19 T=23 W=-4

D.L=18 T=23 W=-5【答案】A【解析】超螺旋的缠绕数与链间螺旋数的关系可用公式表示为:L=T+W,其中L为连接数,T为双螺旋的缠绕数,W为超螺旋数。大肠杆菌中拓扑异构酶Ⅰ催化的结果是:切断一个链,超螺旋DNA增加一个连接数,减少一个负超螺旋。

8在核酸分子中核苷酸之间的连接方式是(  )。[北京科技大学2008研]

A.2′-3′磷酸二酯键

B.2′-5′磷酸二酯键

C.3′-5′磷酸二酯键

D.糖苷键【答案】C【解析】核酸是由核苷酸以3′-5′磷酸二酯键彼此连接起来的生物大分子。

9IS元件(  )。[浙江工业大学2008研]

A.全是相同的

B.具有转座酶基因

C.是旁侧重复序列3

D.每代每个元件转座10【答案】B【解析】IS是不含任何宿主基因的最简单的转座子。IS是很小的DNA片段,末端具有反向重复序列,中央区域可能含有1~3个可读框,--34其中一个编码转座酶。一般情况下,每个IS转座频率10~10/世-10-6代,恢复频率10~10/世代。

10关于玉米的非自主性转座子的转座,以下叙述哪一个是正确的?(  )[南京大学2008研]

A.由于自身缺少有活性的转座酶,它们不会发生转座作用

B.基因组中含有其他任意一种自主性转座子时,转座就可发生

C.不需要其他转座子的存在,就可以发生转座

D.只有当基因组同时含有属于同一家族的自主性转座子时,转座才可以发生【答案】D【解析】玉米细胞内的转座子分为自主性和非自主性两类转座子。非自主性转座子单独存在时是稳定的,不能转座,当基因组中存在与非自主性转座子同家族的自主性转座子时,它才具备转座功能,可以发生转座。这类转座子虽然缺失内源序列,但其两端转座特征序列却是完整的,只要细胞内有相应的转座酶活性,它就能恢复转座功能。

11下列哪一种类型的酶可能不参与切除修复(Excisional Repair)?(  )[北京理工大学2008研]

A.DNA聚合酶

B.RNA聚合酶

C.DNA连接酶

D.解旋酶(helicase)

E.外切酶(exonuclease)【答案】B【解析】DNA切除修复包括碱基切除修复和核苷酸切除修复两种。前者修复过程中需要AP核酸内切酶切除受损片段,DNA聚合酶Ⅰ和DNA连接酶修复DNA链;后一种修复过程中,DNA外切酶切割移去DNA,解链酶解开12~13个核苷酸(原核)或27~29个核苷酸(真核)的单链DNA,再由DNA聚合酶和DNA连接酶修复DNA链。

12除下列哪种酶外,皆可参加DNA的复制过程?(  )[北京交通大学2007研]

A.DNA聚合酶

B.引发酶

C.连接酶

D.水解酶【答案】D【解析】A项,DNA聚合酶负责合成子链DNA。B项,引发酶合成RNA引物,引发DNA的合成。C项,连接酶将小的冈崎片段连接成大的DNA分子。

13端粒酶是一种蛋白质-RNA复合物,其中RNA起(  )。[中国科学院2007研]

A.催化作用

B.延伸作用

C.模板作用

D.引物作用【答案】C【解析】端粒酶能够利用自身携带的RNA链作为模板,以反转录的方式催化合成模板后随链5′端DNA片段或外加重复单位,以维持端粒一定的长度,从而防止染色体的短缺损伤。

14识别大肠杆菌DNA复制起始区的蛋白质是(  )。[厦门大学2006研]

A.DnaA蛋白

B.DnaB蛋白

C.DnaC蛋白

D.DnaG蛋白【答案】A【解析】复制起始点(oriC)含有4个9bp的保守序列和3个13bp的串联重复序列。DNA复制起始时,DnaA蛋白与oriC的4个9bp的保守序列相结合形成多聚体,和ATP的共同作用下使3个13bp的串联重复序列变性,形成开链。

15下列哪一项对于DNA作为遗传物质是不重要的?(  )[中国科学技术大学2005研]

A.DNA分子双链且序列互补

B.DNA分子的长度可以非常长,可以长到将整个基因组的信息都包含在一条DNA分子上

C.DNA可以与RNA形成碱基互补

D.DNA聚合酶有3′→5′的校读功能【答案】B【解析】A项,DNA分子双链且序列互补能保证稳定地传递给后代。B项,作为遗传物质,DNA要有贮存巨大遗传信息的能力,但不需要全部包含于一条DNA分子上。C项,DNA需要通过转录和翻译得到蛋白质,与RNA形成碱基互补可以实现转录。D项,DNA在复制时,会出现碱基错配,因此要求DNA聚合酶具有校对功能,来保证亲代和子代DNA之间的稳定性。

16某双链DNA样品,含20摩尔百分比的腺嘌呤,其鸟嘌呤的摩尔百分比应为(  )。[华中科技大学2005研]

A.30

B.20

C.50

D.10【答案】A【解析】在DNA分子中存在碱基互补配对原则即A-T、G-C配对,因此A(腺嘌呤)与T均为20摩尔百分比,C与G(鸟嘌呤)均为30摩尔百分比。

17(多选)下列描述真核生物基因组特点正确的是(  )。[扬州大学2018研]

A.基因组较大

B.具有多个复制起点

C.具有操纵子结构

D.转录产物为单顺反子

E.含有断裂基因【答案】ABDE【解析】真菌基因组基本上没有操纵子结构。

18(多选)中心法则是指(  )。[扬州大学2018研]

A.DNA复制

B.DNA修复

C.转录

D.翻译

E.DNA重组【答案】ACD【解析】中心法则如下图所示。

图1-2-1 中心法则示意图

19(多选)哺乳动物线粒体和植物叶绿体基因组是靠D环复制的。下面哪些叙述正确地描述了这个过程?(  )[南京航空航天大学2007研]

A.两条链都是从OriD开始复制的,这是一个独特的二级结构,由DNA聚合酶复合体识别

B.两条链的复制都是从两个独立的起点同时起始的

C.两条链的复制都是从两个独立的起点先后起始的

D.复制的起始是由一条或两条(链)替代环促使的【答案】CD【解析】D环复制是单向复制的一种特殊方式,叶绿体和线粒体DNA均采用这样的机制。双链环在固定点解开进行复制,但两条链的复制是高度不对称的,最初仅以一条母链作为新链合成的模板,迅速合成出互补链,另一条链则成为游离的单链环;当新合成的替代链经过固定的起始点时,另一条链的合成开始启动。

二、填空题

1染色体中正在复制的活性区呈Y型结构,称为______。[河北大学2016研]【答案】DNA复制叉【解析】复制叉是指DNA复制时在DNA链上通过解旋、解链和SSB蛋白的结合等过程形成的Y型或叉形结构。

2复合转座子两侧是由______组成的臂,中间携带编码转座酶以外的其他基因。[中国科学技术大学2015研]【答案】插入序列【解析】复合型转座子是一类带有某些抗药性基因(或其他宿主基因)的转座子,其两翼往往是两个相同或高度同源的插入序列(IS)。

3Meselson-Stahl的DNA半保留复制证实试验中,区别不同DNA用______方法,分离不同DNA用______方法,测定DNA含量用______方法。[西北农林科技大学2015研]【答案】同位素示踪;氯化铯密度梯度离心;紫外分光光度【解析】Meselson-Stahl的DNA半保留复制证实试验:Meselson和15Stahl用N标记3个世代的大肠杆菌DNA,然后将这种DNA分离出来,进行氯化铯密度梯度离心分离DNA,最后用紫外分光光度法测定DNA含量。

4DNA后随链合成的起始需要一段短的______,它是由______酶以核糖核酸为底物合成的。[电子科技大学2012研]【答案】RNA引物;引发【解析】后随链开始DNA合成时,需要一段RNA引物引发复制。引发酶是dnaG基因的产物,是RNA聚合酶,仅用于合成DNA复制所需的一小段RNA。

5真核生物的DNA含有许多重复序列,按其复性快慢可分为______、______和______3类。[湖南农业大学2011研]【答案】高度重复序列;中度重复序列;不重复序列【解析】根据DNA复性动力学研究,真核生物的DNA序列可以分为3类:①不重复序列:在单倍体基因组中,一般只有一个或几个拷贝,占DNA总量的40%~80%,在复性动力学中对应于慢复性组分;②中14度重复序列:重复次数为10~10,占DNA总量的10%~40%,在复性动力学中对应于中间复性组分;③高度重复序列(卫星DNA):由6~100个碱基组成,在DNA链上串联重复成千上万次,占基因组的10%~60%,在复性动力学中对应于快复性组分。

6转座作用可能引起的突变类型包括a.______、b.______、c.______。[南京大学2008研]【答案】重复;缺失;倒位【解析】转座子插入后往往会造成插入位置上出现受体DNA的少数核苷酸对的重复;当复制性转座发生在宿主DNA原有位点附近时,往往导致转座子两个拷贝之间的同源重组,引起DNA缺失或倒位。

7核苷酸通过______键连接形成核酸分子,核苷酸中的碱基使核苷酸与核酸在______附近具有最大的紫外吸收值。[北京师范大学2008研]【答案】磷酸二酯;260nm

8天然染色体末端不能与其他染色体断裂片段发生连接,这是因为天然染色体的末端存在______结构。[中国科学院研究生院2008研]【答案】端粒【解析】端粒是真核生物线性基因组DNA末端的一种特殊结构,是一段DNA序列和蛋白质形成的复合体,具有保护线性DNA的完整复制、保护染色体末端和决定细胞的寿命等功能。

9大肠杆菌DNA聚合酶______的生理功能主要起修复DNA的作用。[华中科技大学2005研]【答案】Ⅱ【解析】DNA聚合酶Ⅱ具有有5′→3′方向聚合酶活性,但酶活性很低;其3′→5′核酸可起校正作用。目前认为DNA聚合酶Ⅱ的生理功能主要是起修复DNA的作用。

三、判断题

1原核生物的mRNA通常是多顺反子,并且通常是边转录边翻译的。(  )[华南理工大学2011研]【答案】对

2高等生物基因组中含有大量的不编码蛋白的序列,因此基因组的大小与其进化程度并不一一对应。(  )[浙江大学2010研]【答案】对【解析】真核生物的单倍体基因组的DNA总量称为C值,对每种生物来说是恒定的。真核生物中存在C值反常现象,即物种的C值与生物结构或组成的复杂性或生物在进化上所处地位的高低不一致现象。这是因为真核生物中不编码蛋白的序列很多,发生变异的概率增加,因此基因组大小会出现很大的变化,在长期的进化过程中,基因组的大小不能完全代表生物进化程度。

3细胞内DNA复制后的错配修复不需要消耗能量。(  )[南开大学2009研]【答案】错【解析】DNA复制过程中发生错配,细胞能够通过准确的错配修复系统识别并校正,其内容包括碱基切除,DNA聚合和连接反应,这些过程均需要消耗能量。

4DNA修复系统进行错配修复时,根据子链DNA甲基化而母链未甲基化来判断子链和母链,从而修复错配的碱基。(  )[山东理工大学2008研]【答案】错【解析】在错配修复中,复制叉只要通过复制起点,母链就会在DNA合成前被甲基化,而子链未来得及甲基化。一旦两条DNA链上碱基配对出现错误,错配修复系统就会以“保留母链,修复子链”的原则,找出错误碱基所在的DNA链,并在对应于母链甲基化腺苷酸上游鸟苷酸5′位置切开子链,根据错配碱基相对于DNA切口的方位启动修复途径,合成新的子链片段。

5具有回文序列的单链可形成发卡结构。(  )[中国科学院研究生院2008研]【答案】对

6大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ只参与修复,不参与复制。(  )[四川大学2006研]【答案】错【解析】大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ既可合成DNA链,又能降解DNA,保证了DNA复制的准确性;也可用于除去冈崎片段5′端RNA引物,保证连接酶将片段连接起来。

7DNA的复制需要DNA聚合酶和RNA聚合酶。(  )[华中科技大学2005研]【答案】对【解析】DNA聚合酶具有5′→3′方向聚合酶活性,只能延长已存在的DNA链,而不能从头合成DNA链。因此DNA复制时,需要RNA引物引发复制,即先由RNA聚合酶在DNA模板上合成一段RNA引物,再由DNA聚合酶从RNA引物的3′端开始合成新的DNA链。

四、名词解释题

1同源重组[中山大学2018研]

答:同源重组是指发生在非姐妹染色单体之间或同一染色体上含有同源序列的DNA分子之间或分子之内的重新组合方式。它是最基本的DNA重组方式。可利用同源重组进行基因打靶,将遗传改变引入靶生物体。可将外源性目的基因定位导入受体细胞的染色体上,通过与该座位的同源序列交换,使外源性DNA片段取代原位点上的缺陷基因,达到修复缺陷基因的目的。

2卫星DNA[宁波大学2018研]

答:卫星DNA是一类高度重复序列DNA。在真核生物中,某些DNA组分和主要的DNA部分在碱基组成上明显不同,并在CsCl梯度离心中形成一个或多个和含有主要DNA组分带明显不同的卫星带。这些在卫星带中的DNA即被称为卫星DNA。从染色体上得到的卫星DNA比主要DNA组分或是轻(富含A+T)或是重(富含G+C)。

3Base flipping[武汉大学2017研]

答:Base flipping中文名称是碱基翻出,是指碱基从双螺旋中翻转出来的现象,有时单个的碱基会从双螺旋中突出,从而使碱基处于酶的催化部位,使碱基甲基化或者除去受损的碱基。碱基翻出现象说明DNA是有弹性的。

4半保留复制[暨南大学2014研;电子科技大学2015研;华南理工大学2017研]

答:DNA的半保留复制是指在DNA复制过程中,双螺旋的DNA分子解螺旋后,分别作为模板,按照碱基互补配对原则,在DNA聚合酶的作用下合成新的互补链,形成的子代DNA分子的一条链来自亲代DNA,另一条链是新合成的一种DNA复制方式。

5冈崎片段[山东师范大学2013研;中国科学院大学2013研;重庆大学2015研;华中科技大学2017研]

答:冈崎片段是指在DNA半不连续复制中,沿着后随链的模板链合成的短DNA片段,能被连接形成一条完整的DNA链(后随链)。冈崎片段的长度在真核与原核生物中存在差别,真核生物的冈崎片段长度约为100~200核苷酸残基,而原核生物的冈崎片段长度约为1000~2000核苷酸残基。

6转座[河北大学2012研;青岛大学2017研]

答:转座又称移位,是指遗传信息从一个基因转移至另一个基因的现象,是由可移位因子介导的遗传物质重排,常被用于构建新的突变体。转座分为复制型和非复制型两大类,在复制型转座中,整个转座子被复制了,所移动和转位的仅仅是原转座子的拷贝;在非复制型转座中,原始转座子作为一个可移动的实体直接被移位。转座有别于同源重组,它依赖于DNA的复制。

7切除修复[东北大学2016研]

答:切除修复是修复DNA损伤最普遍的方式,普遍存在各种生物细胞中,主要有碱基切除修复和核苷酸切除修复两种。在碱基脱落形成的无碱基位点、嘧啶二聚体、碱基烷基化、单链断裂等多种DNA损伤中,可起修复作用。

8SNP[华南理工大学2015研;东北大学2016研]

相关试题:Single Nucleotide Polymorphism[武汉大学2015研]

答:SNP全称Single Nucleotide Polymorphism,中文名称为单核苷酸的多态性,是指在基因组DNA序列中由于单个核苷酸(A、T、C和G)的突变而引起的多态性。单核苷酸多态性是基因组最简单最常见的多态性形式,具有很高的遗传稳定性。SNP所表现的多态性只涉及单个碱基的变异,这种变异可由单个碱基的转换、颠换、插入或缺失引起。

9Single-strand binding protein[武汉大学2015研]

相关试题:单链结合蛋白(SSB蛋白)[浙江工业大学2013研]

答:Single-strand binding protein的中文名称是单链结合蛋白(SSB蛋白),又称DNA结合蛋白,是一种在远低于解链温度时使双链DNA分开,并牢牢地结合在单链DNA上的蛋白。SSB蛋白的作用是保证被解链酶解开的单链在复制完成前能保持单链结构,它以四聚体形式存在于复制叉处,待单链复制完成后才离开,重新进入循环。SSB蛋白可以保持单链的存在,并没有解链的作用。

10核小体[北京师范大学2014研;重庆大学2015研]

答:核小体是染色体的基本结构单位,由DNA和组蛋白构成。其结构特点表现为:①每个核小体单位包括200bp左右的DNA和一个组蛋白八聚体以及一个分子的组蛋白H。②组蛋白八聚体由HA、HB、122H和H各两个分子所形成,是构成核小体的核心颗粒。③有146bp的34DNA分子直接以左手方向盘绕在八聚体颗粒的表面,其余的DNA片段连接相邻的核小体。④一分子组蛋白H与DNA结合,锁住核小体1DNA的进出口,从而稳定了核小体的结构。

11拓扑异构酶(topoisomerase)[江苏大学2005研;浙江工业大学2015研]

答:拓扑异构酶是指能改变DNA分子拓扑性质的酶,该酶通过改变封闭环状DNA分子的拓扑连环数或超螺旋数来改变DNA的拓扑性质。拓扑异构酶能够消除解链造成的正超螺旋的堆积,消除阻碍解链继续进行的压力,使复制得以延伸。该酶分为两类:①Ⅰ型拓扑异构酶在DNA双链上的一条链上引入缺口;②Ⅱ型拓扑异构酶在DNA双链上引入短暂的缺口,然后打通和再封闭,以改变DNA的拓扑状态。

12C值反常[浙江工业大学2014研]

答:C值反常,又称C值谬误,是指物种的C值与生物结构或组成的复杂性或生物在进化上所处地位的高低不一致的现象,即C值与其进化复杂性之间无严格对应关系。C值是指一种生物单倍体基因组DNA的总量,在真核生物中,C值一般是随生物进化而增加的,高等生物的C值一般大于低等生物,而某些两栖类的C值与种系进化的复杂程度不一致,甚至比哺乳动物还大。这是因为真核生物中不编码蛋白的序列很多,发生变异的概率增加,因此基因组大小会出现很大的变化,在长期的进化过程中,基因组的大小不能完全代表生物进化程度。

13多顺反子[浙江大学2013研]

答:多顺反子是指在原核生物细胞中几种不同的mRNA连在一起,相互之间由一段短的不编码蛋白质的间隔序列所隔开的mRNA分子。多顺反子出现于原核生物,功能相关的基因串联在一起,转录在一条mRNA链上,然后再翻译成各种蛋白质。一个mRNA分子编码多个多肽链,这些多肽链对应的DNA片段则位于同一转录单位内,共用同一对起点和终点;有些mRNA的编码区可生成多个不同的蛋白质。

14ARS[深圳大学2013研]

答:ARS即autonomously replicating sequence,中文名称是自主复制序列,它是在真核生物中发现的一类能启动DNA复制的序列,含有一个AT富集保守序列。ARS是是染色体正常起始复制所必需的。

15DNA解链温度(melting temperature,T)[北京师范大学m2008研]

答:DNA解链温度(T)又称熔点,是指DNA变性过程中,mDNA溶液的紫外吸光度增加到最大值一半时的温度,是DNA的一个特征常数。T值大小的影响因素主要有:DNA中G+C的含量、溶液中m的离子强度、DNA的均一性、溶液pH值、DNA双链本身的长度及变性剂等。

16重组修复[中国科学院研究生院2007研]

答:重组修复,又称“复制后修复”,它发生在复制之后,是指机体细胞在复制起始时,先跳过尚未修复的DNA损伤部位,先在新合成链中留下一个对应于损伤序列的缺口,然后从同源DNA母链上将相应核苷酸序列片段移至子链缺口处,再用新合成的序列补上母链空缺的过程。

17Telomerase[上海交通大学2006研]

相关试题:端粒酶[北京师范大学2014研]

答:Telomerase的中文名称为端粒酶,是指由蛋白质和RNA两部分组成的一种反转录酶。端粒酶能够以自身含有的RNA作为模板序列,指导合成染色体末端的端粒DNA的重复序列片段,从而避免了子链端粒序列的缩短,所以能增强体外细胞的增殖能力,无限分裂。在正常的体细胞中,端粒酶处于失活状态,在肿瘤中被重新激活,端粒酶可能参与恶性转化。

五、简答题

1向DNA溶液中加入无水乙醇和盐会使DNA形成沉淀,请解释原因。[浙江工业大学2018研]

答:加入无水乙醇和盐使DNA形成沉淀的原因是:(1)DNA溶液中DNA以水合状态稳定存在,乙醇可以任意比和水相混溶,故当加入乙醇时,乙醇会夺去DNA周围的水分子,使DNA失水而易于聚合。乙醇与DNA不发生化学反应,是理想的沉淀剂。(2)在pH为8左右的溶液中,DNA分子是带负电荷的,加一定浓+度的盐(如NaAc或NaCl等),使Na中和DNA分子上的负电荷,减少DNA分子之间的同性电荷相斥力,易于互相聚合而形成DNA钠盐沉淀。但是,盐浓度不够会造成DNA沉淀不完全,而盐浓度太高,沉淀的DNA中会残留过多的盐杂质,影响后续反应。

2简述大肠杆菌3种DNA聚合酶的催化活性和基本生物功能。[河北大学2017研]

答:大肠杆菌3种DNA聚合酶的催化活性和基本生物功能如表1-2-1所示。表1-2-1 大肠杆菌DNA聚合酶性质、功能的比较

3说出参与DNA复制的物质及其功能。[武汉科技大学2015研]

答:参与DNA复制的物质及其功能如表1-2-2所示。表1-2-2 参与DNA复制的物质及其功能

4简述转座子的概念、分类和结构特征。[浙江工业大学2012研]

相关试题:原核生物与真核生物存在哪些类型的转座子?转座机理有哪些?[武汉大学2004研]

答:(1)转座子的概念

转座子是存在于染色体DNA上可自主复制和位移的基本单位。它们可以直接从基因组的一个位点移到另一个位点(供体和受体)。(2)转座子的分类

转座子分为两大类:

①插入序列

插入序列(IS)是指不含有任何宿主基因的最简单的转座子。

②复合型转座子

复合型转座子是一类带有某些抗药性基因(或其他宿主基因)的转座子。包含末端带有IS的复合转座子和没有IS的复合转座子两种类型。(3)转座子的结构特征

①插入序列

a.IS是可以独立存在的单元,带有介导自身移动的蛋白,也可作为其他转座子的组成部分。

b.常见的IS都是很小的DNA片段(约1千碱基对),末端具有反向重复序列,转座时往往复制宿主靶位点一小段(4~15碱基对)DNA,形成位于IS两端的正向重复序列。

②复合型转座子

a.末端带有IS的复合转座子

两翼往往为两个相同或高度同源的IS。IS插入到某个功能基因两端时形成复合型转座子后,IS将不能单独移动,且复合转座子的转座能力由IS决定和调节。

b.没有IS的复合转座子

即TnA家族,是指没有IS的、体积庞大的转座子(5000bp以上),带有3个基因,两翼带有38bp的反向重复序列。

5比较原核与真核基因组结构特点。[浙江工业大学2008研]

相关试题:病毒、原核、真核基因组的结构特点?[电子科技大学2011研]

答:(1)原核基因组的结构特点

①结构简练:非编码序列极少,与真核细胞DNA冗余现象完全不同。

②存在转录单元:转录产物为多顺反子mRNA,即含多个mRNA的分子。

③有重叠基因:即同一段DNA含有两种不同蛋白质的信息。(2)真核基因组的结构特点

①真核基因组庞大,一般都远大于原核生物的基因组。

②真核基因组存在大量的重复序列。

③真核基因组大部分为非编码序列,占整个基因组序列的90%以上,这是真核生物与细菌和病毒之间最主要的区别。

④真核基因组的转录产物为单顺反子。

⑤真核基因是断裂基因,有内含子结构。

⑥真核基因组存在大量的顺式作用元件,包括启动子、增强子、沉默子等。

⑦真核基因组中存在大量的DNA多态性。

⑧真核基因组具有端粒结构,起保护线性DNA的完整复制、保护染色体末端的作用。

6原核生物和真核生物复制起始控制的主要特征。[北京理工大学2008研]

相关试题:真核生物与原核生物的蛋白质翻译起始过程主要有哪些不同?[南京大学2011研]

答:(1)原核生物复制起始控制的主要特征

①只有一个复制起始位点,可以连续开始新的复制,有多个复制叉;

②大肠杆菌染色体DNA复制起点编码复制调节蛋白质、复制起点与调节蛋白质相互作用并启动复制;

③复制叉的多少决定了复制起始频率的高低。(2)真核生物复制起始控制的主要特征

①复制一旦启动,在完成本次复制前,不能再启动新的复制;

②DNA复制只发生在S期,细胞周期水平的调控,决定细胞停留在G还是进入S期;1

③染色体水平调控,决定不同染色体或同一染色体不同部位的复制子按一定顺序在S期进行复制;

④复制子水平的调控决定复制的起始与否,这种调控不论是单细胞生物还是高等生物都是高度保守的。

7转座作用有哪些遗传学效应?[江苏大学2007研]

答:DNA转座的遗传学效应主要有以下几个方面:(1)转座引起插入突变

各种IS、Tn转座子都可以引起插入突变。如果插入位于某操纵子的前半部分可能造成极性突变,导致该操纵子的后半部分结构基因的表达失活。(2)转座产生新的基因

如果转座子上带有抗药性基因,除了造成靶DNA序列上的插入突变外,同时也使该位点产生抗药性。(3)转座产生染色体畸变

当复制性转座发生在宿主DNA原有位点附近时,往往导致转座子两个拷贝之间的同源重组,引起DNA的缺失或倒位。若同源重组发生在两个正向重复转座区之间,可导致宿主染色体DNA缺失;而当重组发生在两个反向重复转座区之间,则引起染色体DNA倒位。(4)转座引起生物进化

由于转座作用,使一些原来在染色体上相距甚远的基因组合到一起,构建成一个操纵子或表达单元,可能产生一些具有新的生物学功能的基因和蛋白质分子。

8原核生物DNA聚合酶Ⅰ不同于聚合酶Ⅲ的酶活性是什么?[中国科学技术大学2005研]

答:原核生物DNA聚合酶Ⅰ不同于聚合酶Ⅲ的酶活性包括:(1)DNA聚合酶Ⅰ的生物学活性低;而DNA聚合酶Ⅲ的生物学活性较高,为DNA聚合酶Ⅰ的15倍。(2)DNA聚合酶Ⅰ的N端具有5′→3′核酸外切酶功能,可作用于双链DNA,又可水解5′末端核苷酸处的磷酸二酯键;而DNA聚合酶Ⅲ没有该功能。(3)DNA聚合酶Ⅰ的C端同时具有DNA聚合酶活性和3′→4′核酸外切酶活性,既可合成DNA链,又能降解DNA,从而保证了DNA复制的准确性;而DNA聚合酶Ⅲ主要负责DNA复制中链的延长反应。

六、论述题

1假基因的形成机制和特点。[武汉大学2017研]

答:假基因与正常基因相似,但丧失正常功能的DNA序列,往往存在于真核生物的多基因家族中,常用ψ表示。假基因是基因组中与编码基因序列非常相似的非功能性基因组DNA拷贝,一般情况都不被转录,且没有明确生理意义。根据其来源可分为:保留了间隔序列的复制假基因(如珠蛋白假基因家族)和缺少间隔序列的已加工假基因(返座假基因)。(1)假基因的形成机制

①复制——非加工假基因(复制假基因)

非加工假基因通过DNA复制产生的。基因组DNA重复或染色体不均等交换过程中基因编码区或调控区发生突变(如碱基置换、插入或缺失),导致复制后的基因丧失正常功能而成为假基因。重复假基因的产生机制为DNA水平上的片段重复。

②返座——已加工假基因(返座假基因)

返座假基因起源于反转录转座作用。mRNA转录本反转录成cDNA后重新整合到基因组,由于插入位点不合适或序列发生突变而失去正常功能,这样形成的假基因称为加工假基因或返座假基因。(2)假基因的特点

大多数假基因本身存在多种遗传缺陷。包括:可读框中的无义突变;非3的整数倍的核苷酸插入或缺失导致阅读框移码;控制基因转录或剪接的调控区的缺失突变,这些缺陷引起基因功能的损失发生在转录水平和/或翻译水平。

①复制假基因的特点

a.常位于其起源功能基因附近;

b.与功能基因有非常相似的结构;

c.含有内含子;

d.目前发现细菌和真核生物中均存在复制假基因。

②已加工假基因的特点

a.两末端一般存在短的正向重复序列;

b.3′末端有poly(A)尾;

c.终止密码子提前出现;

d.产生移码突变;

e.缺乏内含子和启动子;

f.目前只有真核生物发现已加工假基因,且形成过程多与RNA聚合酶Ⅱ有关。

2列举参与DNA复制的酶和相关的蛋白质及其功能。[湖南农业大学2012研]

答:参与DNA复制的酶和蛋白质及其功能如下:(1)DNA聚合酶:以母链DNA为模板,以四种dNTP为底物,催化新链不断延长,合成起始时需要引物提供3′-OH。此外,DNA聚合酶还有核酸外切酶活性。(2)解旋、解链两类:包括DNA解链酶、单链结合蛋白和拓扑异构酶。

①DNA解链酶:能使双链DNA碱基对之间的氢键解开,每解开一对碱基,需消耗2个ATP。大部分DNA解链酶可沿后随链模板的5′→3′方向并随着复制叉前进而移动。

②单链结合蛋白:单链结合蛋白可以在远低于解链温度时使双链DNA分开,并牢牢地结合在单链DNA上,保证被解链酶解开的单链在复制完成前能保持单链结构,它以四聚体形式存在于复制叉处,待单链复制完成后才离开,重新进入循环。

③拓扑异构酶:在复制过程中,随着DNA的解旋,双螺旋的盘绕数减少,而超螺旋数增加,使正超螺旋增加,未解链部分的缠绕更加紧密,形成的压力使解链不能继续进行。拓扑异构酶能够消除解链造成的正超螺旋的堆积及阻碍解链继续进行的压力,使复制得以延伸。(3)引发酶:是一种特殊的RNA聚合酶,该酶以DNA为模板,催化合成一段RNA链即引物,复制时由DNA聚合酶从RNA引物3′端开始合成新的DNA链。(4)DNA连接酶:连接DNA链3′-OH末端和另一DNA链的5′-P末端,使二者生成磷酸二酯键,从而把两段相邻的DNA链连成完整的链。

3影响DNA损伤的因素是什么?如何修复?说明修复机制对生物体的意义。[中国科学院2010研]

相关试题:如果DNA在复制过程中出现了错配,细胞怎样对它进行修复?[北京交通大学2007研]

答:(1)DNA损伤的影响因素

①自发因素-10

a.DNA复制中的错误:DNA复制过程中,错配率在10左右,可导致DNA损伤。

b.DNA的自发性化学变化:如碱基的异构互变、碱基的脱氨基作用、脱嘌呤与脱嘧啶、碱基修饰与链断裂、DNA的甲基化和其他结构变化等,可能导致DNA老化。

②物理因素

a.紫外线照射:使同一条DNA链上相邻的嘧啶以共价键连成二聚体。

b.电离辐射:有直接和间接的效应。直接效应是指DNA直接吸收射线能量而遭损伤;间接效应是指DNA周围其他分子(主要是水分子)吸收射线能量,产生具有很高反应活性的自由基进而损伤DNA。电离辐射可导致DNA分子产生多种变化,如碱基变化、脱氧核糖变化、DNA链断裂及交联等。

③化学因素

各种化学诱变剂:如烷化剂对DNA的损伤、碱基类似物和修饰剂对DNA的损伤,还有一些人工合成或环境中存在的化学物质,能专一修饰DNA链上的碱基或通过影响DNA复制而改变碱基序列。(2)DNA损伤的修复

细胞可以通过错配修复、切除修复、重组修复、DNA直接修复和SOS反应等修复系统对DNA损伤进行修复。

①错配修复

错配修复是指在DNA复制过程中发生错配时,细胞能够通过准确的错配修复系统将其识别,并加以校正,DNA子链中的错配几乎完全能被修正,充分反映了母链序列的重要性。

②切除修复

切除修复是修复DNA损伤最普遍的方式,普遍存在各种生物细胞中,主要有碱基切除修复和核苷酸切除修复两种。在碱基脱落形成的无碱基位点、嘧啶二聚体、碱基烷基化、单链断裂等多种DNA损伤中,可起修复作用。

③重组修复

重组修复又称“复制后修复”,发生在复制之后。机体细胞对在复制起始时尚未修复的DNA损伤部位可以先复制再修复,即先跳过该损伤部位完成全部链复制后再进行修复。

④DNA的直接修复

直接修复是指不需要切除碱基或核苷酸,把损伤的碱基回复到原来状态的一种修复,最普遍的是利用光进行修复。

⑤SOS反应

SOS反应是细胞DNA受到损伤或复制系统受到抑制的紧急情况下,细胞为求生存而产生的一种应急措施。SOS反应包括诱导DNA损伤修复、诱变效应、细胞分裂的抑制以及溶原性细菌释放噬菌体等。(3)修复机制对生物体的意义

①DNA存储着生物体赖以生存和繁衍的遗传信息,因此维护DNA分子的完整性对细胞至关重要;

②细胞具备高效率的修复系统,是其保持基因组的稳定性、减少生物突变率的重要手段;

③DNA分子的变化并不是全部都能被修复成原样,因此在生物进化中突变又是普遍存在的现象,正因如此生物才会有变异、有进化。

可见,修复系统的存在对维持细胞基因组的稳定性和生物进化都有非常重要的作用。

4试述大肠杆菌基因组DNA复制忠实性维护的工作机制。[北京理工大学2008研]

答:大肠杆菌基因组DNA复制忠实性维护的工作机制如下:(1)DNA聚合酶具有模板依赖性,复制时dNTP按A-T、G-C碱基配对规律对号入座,使子代DNA与亲代DNA核苷酸顺序相同,但同时-4有大约10的错配;(2)DNA聚合酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均有3′→5′核酸外切酶活性,有纠正-6错配的校正作用,可修复DNA使错配减至10;(3)根据“保存母链,修复子链”的原则,DNA的错配修复系统找出错配碱基所在的DNA链,并在对应于母链甲基化腺苷酸上游鸟苷酸的5′位置切开子链,再根据错配碱基相对于DNA切口方向启动修复-9途径,合成新的子链DNA片段,最终可使错配减至10以下。

5试述DNA复制的过程,总结复制的基本规律。[南京航空航天大学2008研]

答:(1)DNA复制的过程

①DNA双螺旋的解旋

DNA在复制时,其双链首先解开形成复制叉,是一个需要多种蛋白质及酶参与的复杂过程。

②DNA复制的引发

所有的DNA聚合酶都从3′羟基端起始DNA合成。前导链和后随链开始DNA合成时,都需要RNA引物引发复制。后随链的引发过程还需要多种蛋白质和酶的协同作用,由引发体完成。

③复制的延伸

在复制的延伸过程中,前导链和后随链的合成同时进行。

a.前导链在引物RNA合成的基础上,连续合成新的DNA,其合成方向与复制叉一致。

b.后随链先合成冈崎片段,再由DNA连接酶连接成为一条完整的子代链。

④复制的终止

当复制叉前移,终止子序列(Ter)中Ter-Tus复合物能使DnaB不再将DNA解链,阻挡复制叉的继续前移,等相反方向的复制叉达到后停止复制。(2)复制的基本规律

①DNA复制是半保留复制:DNA复制过程中,其中一条子链来源于母链模板,而另外一条是新合成的。

②复制起始出现在称为原点的特定序列上:DNA复制有复制起点,从复制起点开始。终止也是在复制过程中的某个固定点。

③复制的控制一般是在复制的起点处:复制一旦开始,只要没有其他阻碍因素,就会一直等到复制完毕。

④复制叉的移动是单向或双向。

⑤链的延伸方向是5′→3′方向:是因为目前所发现的DNA聚合酶都只有5′→3′DNA聚合活性。

⑥大多数情况下DNA复制是半不连续复制:DNA复制过程中,前导链的复制是连续进行的,而后随链的复制是不连续复制,即先形成一系列的短片段(冈崎片段),然后再连接成完整的DNA片段。

⑦DNA聚合酶以短的RNA片段作为引物开始合成DNA:目前所发现的DNA聚合酶都只能延长已存在的链,而不能启动新的链的合成,因此DNA复制中需要有引物的引发。

⑧存在各种DNA链的合成起始机制:除了RNA引发外,还包括DNA链与一个末端蛋白共价结合,以及缺口的共价延伸,或者亲本链已被环化的末端等。

⑨复制的机制取决于基因组结构和构象以保持产生完整的染色体。

⑩即使在单个细胞中也可进行多种复制机制的操作。

6试述哺乳动物是如何解决染色体DNA末端稳定性问题的。[南京大学2008研]

答:哺乳动物能够通过形成端粒结构和具有反转录酶活性的端粒酶来解决DNA复制时产生的染色体末端不稳定问题。(1)端粒是真核细胞线性染色体末端的一组短的串联重复DNA序列,它能防止染色体的重组和末端降解酶的作用,从而维持染色体的稳定。端粒可由端粒酶加到DNA末端。(2)端粒酶是一种RNA与蛋白的复合体,其蛋白组分具有逆转录酶的活性,它以自身RNA上的一个片段为模板,通过逆转录合成端粒重复序列,并通过一引物延伸模板转换的机制添加到染色体3′末端,以维持端粒一定的长度,从而防止染色体的缺短损伤。

7简介DNA聚合酶Ⅰ和Klenow大片段的结构与功能。[浙江大学2008研]

答:(1)DNA聚合酶Ⅰ的结构与功能

DNA聚合酶Ⅰ可以被蛋白酶切成2个区域:

①占DNA聚合酶Ⅰ蛋白2/3的C端区域:相对分子质量68000,具有DNA聚合酶活性和3′→5′核酸外切酶活性,既可合成DNA又可降解DNA,保证DNA复制的准确性。

②占DNA聚合酶Ⅰ蛋白1/3的N端区域:相对分子质量35000,具有5′→3′核酸外切酶的活性。可作用于双链DNA;又可水解5′末端或距5′末端核苷酸处的磷酸二酯键;还可用于除去冈崎片段5′端RNA引物,使冈崎片段间缺口消失,保证连接酶将片段连接起来。(2)Klenow大片段的结构与功能

Klenow大片段是指用蛋白酶水解DNA聚合酶Ⅰ所得的大片段C端区域,具有5′→3′聚合酶活性和3′→5′核酸外切酶活性。Klenow大片段在基因工程中有广泛的应用,主要有:

①根据修复反应制备平末端;

②标记DNA中3′突出末端;

③双脱氧末端终止法进行DNA序列分析;

④定点突变中用于cDNA第二链的合成;

⑤用引物延伸法制备单链DNA探针等。

试读结束[说明:试读内容隐藏了图片]

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