作者：杨向竹、徐雅
出版社：中国中医药出版社
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实验室基本技术和中医学综合实验指导(十二五)试读：
前言
随着教育理念的更新和医学模式的转变，注重医学生实践能力、创新精神、综合素质的培养已成为医学教育的共识，加强医学实践教学、改革医学实践的教学内容和模式已得到广泛认可。在我国，高等中医药院校经过半个多世纪的建设与发展，实现了从传统教育方式向现代教育方式的转变，现代中医药高等教育已经成为我国高等教育体系的重要组成部分，完善中医药学及其相关专业实践教学体系、突出实践教学环节、强调中医药实践教学特色的改革已在中医药院校普遍展开，围绕中医药院校实践教学教材的改革，特别是基础医学实验教材和中医药特色实验教材的建设工作势在必行。我们在北京中医药大学以及中国中医药出版社的大力支持下，组织编写了这套高等中医药院校创新系列实验教材。
本次出版的高等中医药院校创新系列实验教材包括三个分册，第一分册《实验室基本技术和中医学综合实验指导》、第二分册《形态学实验指导》、第三分册《机能学实验指导》，基本包括了中医药学及其相关专业学生的基础实验教学内容。
本系列创新实验教材的编写和中医药院校基础实验教学的改革密切联系，编委会多次组织各分册主编进行研讨，专门聘请兄弟院校的专家介绍基础实验改革经验，力求通过这套教材的推广使用，促进中医药院校实验教学模式的转变，并为新实验教学体系的建立提供教材保证。
本系列创新实验教材的编写是在查阅国内同类教材的基础上进行的，既遵循医学实验教学的规律，又开阔思路、大胆创新，对这套教材进行了整体创新设计。将原来基础实验教学中分散在生物学、组织学、生物化学和生理学实验中的一些医学基本实验方法和技术进行有机整合，编写了第一分册《实验室基本技术和中医学综合实验指导》，“实验室基本技术”部分从医学实验的需要出发，增加了实验室安全知识的内容，并根据中医学的特点增加了中药汤剂的制备及计量计算的实验内容，这样既减少了重复，又给学生建立了基础医学实验的整体概念；“中医学综合实验指导”部分依据高等中医药院校人才培养的需求编写了独具特色的中医学实验，将中医学的基本理论与现代医学密切联系，在我校多年进行中医学实验的基础上，从验证性、综合性和设计性多个层次进行精心设计，使中医药院校的学生在了解中医辨证论治规律的同时，也了解中医药应用的科学性，以开拓学生的视野，锻炼学生的动手能力，提高学生的创新意识，并初步使学生建立中医学科研的基本思路。第二分册以人体组成系统为主线，将器官的大体正常解剖形态结构和病理解剖的变化相比较，将肉眼和显微镜观察相结合，图文并茂，使学生对人体主要器官的正常形态和病理变化、大体结构和微细结构有一个全面的认识，使原来在解剖学、组织学和病理学分别学到的知识在实践教学中得到进一步融会贯通。第三分册上篇将生理学、药理学和病理生理学的实验进行有机整合，使学生在认识人体某些生理现象的同时，还熟悉了药物的影响以及病理状态下机体生理功能的改变，强化了基础实验与临床的密切关系；下篇除了介绍生物化学经典基本实验外，密切结合现代疾病谱的变化编写了糖、蛋白质及肝脏功能代谢方面的综合实验，还增加了学生设计性实验的内容，使学生将从生物化学中学到的理论知识与临床疾病的诊断方法密切联系起来，既加深了对机体代谢过程的理解，也观察到了某些疾病引起的机体代谢功能的改变。
总之，本系列实验教材从编写理念、思路到框架搭建以及内容编排上都力求创新，改变了以往单纯以理论课程为中心设计验证性实验的模式，以临床医学的需要为导向，加大了综合性实验和设计性实验的比例，以提高学生分析问题和解决问题的能力；以器官和疾病为中心，强化基础和临床的结合、传统中医和现代医学的融合，以培养学生的创新思维和动手能力。
本系列教材是高等中医药院校首次编写的创新基础医学实验教材，编写人员都是长期从事解剖学、组织学、生物学、生理学、生物化学、中医实验学教学的一线教师，他们为编写这套实验教材花费了大量心血。正由于是第一次编写创新实验教材且时间匆忙，因此难免存在一些问题和不足，望读者提出宝贵意见，以便修改。孙红梅 贺娟编写说明《实验室基本技术和中医学综合实验指导》分为上篇“实验室基本技术”与下篇“中医学综合实验指导”两部分。上篇包括实验室安全知识、常用实验设备使用、常规操作技术、中药汤剂的制备及计量计算和医学基础实验。将实验室基本实验技术分门别类进行介绍，使学生通过对本教材的学习了解基础医学实验室的概况及安全规程，掌握基础医学实验中一些基本操作技能及注意事项，学生在进行基础医学实验及课程学习之前首先完成基本技能的训练，为后续的学习打下良好坚实的基础。下篇体现了中医药特色，在验证性实验部分每个实验都结合方剂的解读，帮助学生领会传统中医的精华理论，同时利用现代科学手段进行验证，如实验一，通过金匮肾气丸对肾阳虚证模型小鼠的作用观察，加深学生对肾及补肾方剂金匮肾气丸临床疗效的认识；综合性实验则将生理、病理、生化等学科知识与中医药理论交叉交融，培养学生中医科研的思维和方法，逐步用系统性、综合性方法分析疾病的病因病机并加深对中医辨证论治思想的认识；设计性实验注重将中医药实验教学与科研及临床应用密切结合，实现基础与前沿、经典与现代的有机融合，使学生综合应用知识能力、探索未知科学的思维能力得到提高锻炼。
本分册本着由基础到综合，逐级递升的思路设计并安排学生实验，力求为学生提供一本基本技能训练-感性验证-理性认识-自我设计逐级推进的实验教材。
本教材的全体编者衷心感谢总主编的创新性思维及辛勤劳动！感谢编写过程中所参考的各种参考书目的作者，他们的成果给了本教材很多启示。同时也感谢北京中医药大学辛勤工作在教学一线的实验教师给予的无私帮助及各位编者的大力支持与真诚合作！
希望本教材的出版能够促进中医药院校实验教学的改革，促进中医药事业的发展，为培养新型的中医药人才做出贡献。
限于编者的水平，谨请使用本教材的教师与学生对教材在内容和文字上的缺陷与错误提出意见与建议，以便再版时修订提高。《实验室基本技术和中医学综合实验指导》编委会2015年5月上篇 实验室基本技术第一章 实验室安全第一节 生物医学实验室安全法律法规及安全防护措施一、国家颁布的生物医学实验室安全法律法规
生物医学实验室是进行与医学相关的实验教学与研究的场所，开展实验动物、人体及其他生物材料的基础医学以及临床相关学科的实验，涉及领域广泛，如操作不当，不仅对实验操作人员的人身安全造成伤害，甚至出现生命危险，而且对实验仪器设备也能造成很大损坏，甚至对环境造成破坏，因此国家颁布了相应的生物医学实验室安全法律法规，以规范生物医学实验。
目前主要有：①《实验室生物安全通用要求》（中华人民共和国国家标准GB1948 9-2008）。②《医学实验室安全要求》（中华人民共和国国家标准GB19781-2005/ISO15190：2003）。③《生物安全实验室建设技术规范》（中华人民共和国国家标准GB50346-2004）。④《病原微生物实验室生物安全管理条例》（中华人民共和国国务院令第424号）。⑤《病原微生物实验室生物安全环境管理办法》（国家环境保护总局［2006］32号）。⑥《医疗机构临床实验室管理办法》（中华人民共和国卫生部［2006］73号）。二、高校实验室安全制度
生物医学实验室按照功能分为不同的实验室，如生物化学及分子生物学实验室、微生物学实验室、细胞学实验室、病理学实验室等，各高校根据国家和有关部门的要求除制定《实验室准入制度》《实验室安全管理制度》《实验室安全应急预案》《易燃易爆及有毒试剂管理条例》等一系列安全制度外，还应该根据不同实验室的特点制定各自实验室的实验操作规范，并进行严格培训，确保实验室人员、财产以及周围环境的安全。三、实验室安全防护设施
为了保证实验人员的安全，在生物医学实验室中，要有相应的防护设施，通常包括实验室防止发生火灾的设施以及实验人员常用的防护用品等。
1.防火设施（1）灭火器：分为泡沫灭火器、干粉灭火器、1211灭火器等，其中干粉灭火器适用范围最广，无论固体、气体、液体试剂或带电物品着火时都可使用。注意，电器着火时应先切断电源，再用干粉灭火器灭火，切不可用水或泡沫灭火器灭火，否则易导电进而爆炸。灭火器的设置应符合以下规定：应设置稳固，并摆放在明显和便于取用的地点，且不得影响安全疏散；不应设置在潮湿或强腐蚀性的地点；不得设置在超出其使用温度范围的地点，避免阳光直射；按规定期限更换灭火器。（2）沙土：乙醇、乙醚、甲苯等可燃液体或金属钠等可燃固体在火势较小时可用砂土灭火，火势大时用干粉灭火器灭火。（3）灭火毯：衣物、电脑显示屏着火时可用。
2.防护用品（1）防护用品：护目镜、口罩、面罩、防毒面具、帽子、防腐蚀工作衣、防护手套、防噪音耳塞等。（2）急救用品：急救箱，其内应有割伤、烫伤、酸（碱）溅伤，以及误服有机试剂、酸、碱等急救药品。（3）逃生用品：绳、厚手套、毛巾、水瓶、手电筒、防毒面具等基本逃生工具。四、安全培训
对于进入实验室进行实验操作的人员均应严格实验室安全培训，培训内容主要分为三个方面：实验室安全培训、生物安全培训、基本操作技能培训。
1.实验室安全培训 指操作人员的个人安全，包括水、电使用安全，化学试剂使用及废液、废物的处理等安全培训。
2.生物安全培训 指医学实验中用以防止发生病原体或毒素无意中暴露及意外释放的防护原则、技术以及实践培训，以防对人体本身及周围环境造成污染，包括对生物材料的安全处理。
3.基本操作技能培训 指对操作人员进行实验技术、常用实验仪器操作的培训。第二节 实验室常用试剂使用安全一、常用化学试剂使用安全（一）危险化学试剂的类型
根据化学试剂的物理化学特性、危险性和便于管理等原则将其分为以下六类：
1.易爆和不稳定物质 如浓过氧化氢、有机过氧化物等。
2.氧化性物质 如过氧化氢等。
3.可燃性物质 除易燃的气体、液体、固体外，还包括在潮气中会产生可燃物的物质，如碱金属的氢化物、碳化钙，以及接触空气自燃的物质，如白磷等。
4.有毒物质 如甲醛等。
5.腐蚀性物质 如硫酸、氢氧化钠等。14
6.放射性物质 如C等。（二）易燃易爆试剂使用注意事项
1.使用时 ①使用易燃易爆试剂进行实验时，实验人员不得离开实验室。如果必须离开，一定要暂停实验。②使用易燃气体或液体实验时，应注意密闭性，其蒸汽不得大量挥发到空气中。因它们的蒸汽浓度达到空气爆炸极限时，遇明火或静电会发生爆炸。如：乙醚、甲醛、甲醇、乙醇、异丙醇、丙酮、苯、甲苯、二甲苯、甲烷、一氧化碳、汽油、柴油等。③万一发生气体泄漏，应立即停止实验、熄灭周围火源、开窗通风并报告相关负责人员。严禁触动电器开关，如开关电灯、换气扇等，禁止在气体泄漏的房间内接打电话。
2.使用后 废液处理时，禁止将酸性液体和碱性液体、氧化性液体和还原性液体倒在一起，否则易发生爆炸。
3.存放 ①易燃易爆试剂要存放在通风良好、无阳光直射、无明火的地方，不能存放在普通冰箱里，禁止穿皮鞋进入存放有易燃易爆试剂的房间。②存放易燃、易爆试剂的房间，应安装防爆灯具和开关，使用专门防爆设计的电器设备。③不得用烧杯等敞口器皿盛放易挥发、易燃的溶剂，溶剂如长期不用，应放到专用储藏室。（三）常用化学试剂的性质及使用安全
1.甲醇（1）毒性：对中枢神经系统有麻醉作用，可引起视神经和视网膜病变。短时大量吸入出现轻度眼、上呼吸道刺激症状（口服有胃肠道刺激症状），经一段潜伏期后出现头痛、头晕、乏力、眩晕，甚至昏迷，重者失明。（2）火灾及爆炸：易燃，其蒸汽与空气可形成爆炸性混合物，遇明火、高热能引起燃烧爆炸，与氧化剂接触发生化学反应或引起燃烧。其蒸汽比空气重，能在较低处扩散到相当远的地方，遇火源会着火回燃。（3）人身防护：密闭操作，加强通风。远离火种、热源，工作场所严禁吸烟。使用防爆型的通风系统和设备。（4）应急处理：污染衣物或接触皮肤，用肥皂水和清水彻底冲洗皮肤。眼睛接触，提起眼睑，用流动清水或生理盐水冲洗。吸入蒸汽，迅速脱离现场至空气新鲜处，保持呼吸道通畅。防止甲醇液体流入下水道、排洪沟等限制性空间。小量泄漏，用砂土或其他不燃材料吸附或吸收，也可以用大量水冲洗，稀释后放入废水系统。（5）贮存：储存于阴凉、干燥、通风处，与氧化剂隔绝，远离火源，炎热气候采取通风降温措施，室温保持低于30℃。
2.苯酚（1）毒性：低浓度酚能使蛋白变性，高浓度能使蛋白沉淀。对皮肤、黏膜有强烈的腐蚀作用，也可抑制中枢神经系统或损害肝、肾功能。（2）火灾及爆炸：苯酚为易燃易爆物，空气中混有3%～10%的苯酚可引起爆炸。遇明火、高温、强氧化剂有引起燃烧危险。（3）人身防护：可能接触其粉尘时，佩戴自吸过滤式防尘口罩。（4）应急处理：皮肤污染后立即脱去污染的衣着，用大量流动清水冲洗至少20分钟。面积小也可先用50%酒精擦拭创面后立即用大量流动清水冲洗，再用饱和硫酸钠溶液湿敷。若眼睛接触用生理盐水或清水至少冲洗10分钟，对症处理。吸入立即脱离现场至新鲜空气处，保持呼吸道顺畅。（5）贮存：储存于阴凉、通风的库房。远离火种、热源。避免光照。库温不超过30℃，相对湿度不超过70%。
3.无水乙醇（1）毒性：属微毒类。本品为麻醉剂，开始时导致神经系统兴奋，继而使之麻醉。（2）火灾及爆炸：易燃，蒸汽能与空气形成爆炸性混合物。着火时，用二氧化碳、雾状水、干粉灭火。（3）人身防护：蒸汽或烟雾浓度不明或存在可检测出浓度时，应佩戴有褐色色标的滤毒盒（罐）的防毒面具。工作场所应备有可用的安全眼睛冲洗器具。（4）应急处理：吸入蒸汽的患者脱离污染区，安置休息并保暖。眼睛接触须用水冲洗15分钟以上，严重患者就医诊治。（5）贮存：储存于阴凉、干燥、通风处，与氧化剂隔绝，远离火源，炎热气候采取通风降温措施，保持库温低于30℃。
4.浓盐酸（1）毒性：对皮肤和黏膜有较强刺激腐蚀作用。蒸汽和烟雾能刺激鼻、喉和上呼吸道，导致咳嗽、鼻和牙龈出血，严重暴露能腐蚀鼻、喉和造成肺水肿。眼睛接触，导致刺激、严重灼伤和失明。浓溶液（大于38%）导致皮肤严重灼伤。（2）火灾及爆炸：不燃烧。用喷水来冷却容器有助于防止爆裂和减少蒸汽。（3）人身防护：如蒸汽或烟雾浓度不明或暴露限值，应戴有黄色色标滤毒罐（盒）的防毒面具。工作时须穿戴手套、工作服。（4）应急处理：吸入时，将患者移至新鲜空气处。眼睛或皮肤接触，用生理盐水或微温的缓流流水冲洗患眼20分钟。（5）贮存：放置于通风的阴凉地方。配制溶液时应缓慢地将酸倒入水中以防溅出和起泡。
5.乙酸（1）毒性：蒸汽对鼻、喉、眼和呼吸道有刺激性。皮肤接触，轻者出现红斑，重者引起化学灼伤。长期反复接触，可致皮肤干燥、脱脂和皮炎。（2）火灾及爆炸：易燃，其蒸汽与空气可形成爆炸性混合物，遇明火、高热能引起燃烧爆炸。与铬酸、过氧化钠、硝酸或其他氧化剂接触，有爆炸危险。具有腐蚀性。（3）人身防护：空气中浓度超标时，应该佩戴自吸过滤式防毒面具（半面罩）。工作时，应戴橡胶耐酸碱手套，穿工作服。（4）应急处理：吸入时，将患者移至新鲜空气处。眼睛或皮肤接触，用生理盐水或微温的缓流流水冲洗患眼20分钟。（5）贮存：储存于阴凉、通风的库房。远离火种、热源。冬季应保持库温高于16℃，以防凝固。保持容器密封。应与氧化剂、碱类分开存放，切忌混储。
6.丙酮（1）毒性：急性中毒主要表现为对中枢神经系统的麻醉作用，出现乏力、恶心、头痛，甚至昏迷。对眼、鼻、喉有刺激性。皮肤长期反复接触可致皮炎。（2）火灾及爆炸：本品极度易燃，其蒸汽与空气可形成爆炸性混合物，遇明火、高热极易燃烧爆炸。与氧化剂能发生强烈反应。其蒸汽比空气重，能在较低处扩散到相当远的地方，遇火源会着火回燃。（3）人身防护：呼吸系统防护，空气中浓度超标时，佩戴过滤式防毒面具（半面罩）。眼睛防护，一般不需要特殊防护，高浓度接触时可戴安全防护眼镜。身体防护，穿防静电工作服。手防护，戴橡胶耐油手套。（4）应急处理：皮肤接触，用肥皂水和清水彻底冲洗皮肤。眼睛接触，提起眼睑，用流动清水或生理盐水冲洗。吸入，迅速脱离现场至空气新鲜处，保持呼吸道通畅。（5）贮存：储存于阴凉、通风的库房。远离火种、热源。库温不宜超过26℃。保持容器密封。应与氧化剂、还原剂、碱类分开存放，切忌混储。
7.氢氧化钠（1）毒性：属于强碱，具有腐蚀和刺激作用。吸入会对鼻、喉和肺产生刺激。眼睛接触，会造成严重灼伤，严重暴露会造成疼痛和永久失明。皮肤接触会造成严重灼伤和深度溃疡，灼伤可能不会立即产生痛感，而是在数分钟或数小时后产生。（2）火灾及爆炸：不可燃。（3）人身防护：使用无渗透性的手套、工作服，合适材料是氯丁橡胶。在直接工作的场所应备有安全淋浴和眼睛冲洗器具。眼睛戴面罩或化学防溅眼镜。（4）应急处理：眼睛、皮肤接触，用微温的缓流流水冲洗患处至少30分钟，在流水下脱去受污染的衣服。（5）贮存：放置于干净、阴凉的地方，储存地方应有单独的通风设备。配制溶液时，应将固体缓慢地加入水中，以防水溅和气泡。
8.浓硫酸（1）毒性：对皮肤、黏膜等组织有强烈的刺激和腐蚀作用。高浓度引起喉痉挛或声门水肿而窒息死亡。皮肤灼伤轻者出现红斑、重者形成溃疡。溅入眼内可造成灼伤，甚至角膜穿孔、全眼炎，以至失明。（2）火灾及爆炸：不可燃。遇水大量放热，可发生沸溅。与易燃物（如苯）和可燃物（如糖、纤维素等）接触会发生剧烈反应，甚至引起燃烧。遇电石、高氯酸盐、硝酸盐、苦味酸盐、金属粉末等猛烈反应，发生爆炸或燃烧。（3）人身防护：可能接触其烟雾时，佩戴自吸过滤式防毒面具（全面罩）或空气呼吸器。戴橡胶耐酸碱手套。（4）应急处理：皮肤、眼睛接触，用大量流动清水冲洗至少15分钟，就医。吸入，迅速脱离现场至空气新鲜处。保持呼吸道通畅。（5）贮存：储存于阴凉、通风的库房。库温不超过35℃，相对湿度不超过85%。保持容器密封。应与易（可）燃物、还原剂、碱类、碱金属分开存放。
9.浓硝酸（1）毒性：其蒸汽有刺激作用，引起眼和上呼吸道刺激症状，如流泪、咽喉刺激感、呛咳等。皮肤接触引起灼伤。（2）火灾及爆炸：强氧化剂。能与多种物质，如金属粉末、电石、硫化氢、松节油等猛烈反应，甚至发生爆炸。与还原剂、可燃物，如糖、纤维素、木屑、棉花等接触，引起燃烧并散发出剧毒的棕色烟雾。（3）人身防护：可能接触其烟雾时，佩戴自吸过滤式防毒面具（全面罩）。操作时戴橡胶耐酸碱手套。（4）应急处理：皮肤、眼睛接触，用大量流动清水冲洗至少15分钟，就医。吸入，迅速脱离现场至空气新鲜处。保持呼吸道通畅。（5）贮存：储存于阴凉、通风的库房。远离火种、热源。库温不宜超过30℃。保持容器密封。应与还原剂、碱类、醇类、碱金属等分开存放，切忌混储。
10.二甲苯（1）毒性：有刺激性，高浓度有麻醉作用，有一定致癌性。（2）火灾及爆炸：可燃，蒸汽能与空气形成爆炸性混合物。（3）人身防护：空气中浓度较高时，佩戴过滤式防毒面具（半面罩），戴化学安全防护眼镜。操作时，戴橡胶手套。吸入、皮肤吸收可造成伤害，须在通风橱内操作。始终远离热源、火花和明火。（4）应急处理：皮肤、眼睛接触用流动清水或生理盐水冲洗。吸入，速脱离现场至空气新鲜处，保持呼吸道通畅。食入，饮足量水，催吐。就医。（5）贮存：贮于低温通风处，远离火种、热源。避免与氧化剂等共储。禁止使用易产生火花的工具。
11.甲醛（1）毒性：有强烈刺激性和窒息性的气味，主要危害表现为对皮肤黏膜的刺激作用。在室内达到一定浓度时，可引起眼红、眼痒、咽喉不适或疼痛、声音嘶哑、胸闷、皮炎等。甲醛浓度过高会引起急性中毒，表现为咽喉烧灼痛、呼吸困难、肺水肿、过敏性紫癜、过敏性皮炎、肝转氨酶升高、黄疸等。甲醛达到30mg/m3时，会立即致人死亡。2010年发现，甲醛能引起哺乳动物细胞核的基因突变、染色体断裂。（2）火灾及爆炸：可燃。（3）人身防护：可能接触其蒸汽时，应该佩戴防毒面具。眼睛须戴化学安全防护眼镜。始终在化学通风橱内进行操作。穿实验服并戴防化学品手套。（4）应急处理：皮肤接触，脱去污染的衣着，用肥皂水及清水彻底冲洗或用2%碳酸氢钠溶液冲洗。眼睛接触，立即提起眼睑，用流动清水或生理盐水冲洗至少15分钟。吸入，迅速脱离现场至空气新鲜处。保持呼吸道通畅。（5）贮存：甲醛易聚合，开瓶后应立即加少量甲醇。水溶液密封避光，在16℃以上的温处保存，低温处不宜久贮。与氧化剂、酸碱类等分储。
12.氯仿（四氯化碳）（1）毒性：有特殊气味，味甜，易挥发。纯品对光敏感，遇光照会与空气中的氧作用，逐渐分解而生成剧毒的光气（碳酰氯）和氯化氢。具有麻醉作用，对心、肝、肾有损害。吸入或经皮肤吸收引起急性中毒，初期有头痛、恶心、兴奋、皮肤湿热和黏膜刺激症状，以后呈现精神紊乱、呼吸表浅、昏迷等，重者发生呼吸麻痹、心室纤维性颤动。（2）火灾及爆炸：不易燃烧。（3）人身防护：密闭操作，局部排风。建议操作人员佩戴直接式防毒面具（半面罩），戴化学安全防护眼镜，穿防渗透工作服，戴防化学品手套。防止蒸汽泄漏到工作场所空气中。（4）应急处理：皮肤接触，立即脱去污染的衣着，用大量流动清水冲洗至少15分钟。眼睛接触，立即提起眼睑，用大量流动清水或生理盐水彻底冲洗至少15分钟。吸入，迅速脱离现场至空气新鲜处。保持呼吸道通畅。（5）贮存：储存于阴凉、通风的库房。库温不超过30℃，相对湿度不超过80%。保持容器密封。应与碱类、铝、分开存放，切忌混储。二、常用生物学试剂的性质及使用安全
1.二甲基亚砜（DMSO） DMSO是一种即溶于水又溶于有机溶剂的极为重要的非质子极性溶剂。对皮肤有极强的渗透性，有助于药物向人体渗透。DMSO也是一种渗透性保护剂，能够降低细胞冰点，减少冰晶的形成，减轻自由基对细胞损害，改变生物膜对电解质、药物、毒物和代谢产物的通透性。在细胞、组织和器官的保存中用作低温冷冻防护剂，可以保护细胞免受冰晶引起的机械性损伤。（1）毒性：DMSO存在严重的毒性作用，与蛋白质疏水基团发生作用，导致蛋白质变性，具有血管毒性和肝肾毒性。吸入高挥发浓度可能导致头痛，晕眩和镇静。对眼睛、皮肤、黏膜和上呼吸道有刺激作用，可引起肺和皮肤的过敏反应。（2）火灾及爆炸：可燃。在某些条件下，DMSO与酰氯接触时，会发生爆炸性反应。（3）人身防护：建议操作人员佩戴自吸过滤式防毒面具（半面罩），戴化学安全防护眼镜，穿防毒物渗透工作服，戴橡胶耐油手套。使用DMSO时要避免其挥发，准备1%～5%的氨水备用，皮肤沾上之后要用大量的水洗，并用稀氨水洗涤。最为常见的中毒症状为恶心、呕吐、皮疹，以及在皮肤和呼出的气体中发出大蒜、洋葱、牡蛎味。（4）应急处理：皮肤、眼睛接触，用大量流动清水冲洗。若吸入，脱离现场至空气新鲜处。（5）贮存：储存于阴凉、通风的库房。远离火种、热源。应与氧化剂、还原剂、卤化物、酸类分开存放。如果是用作冷冻保护剂，必须避光，在光的条件下，该物发生聚合，则失去保护作用。
2.溴化乙锭（EB） EB是一种高度灵敏的荧光染色剂，用于观察琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中的DNA。当染料分子插入后，其平面基团与螺旋的轴线垂直并通过范德华力与上下碱基相互作用。DNA吸收254nm处的紫外线并传递给染料，而被结合的染料本身吸收302nm和366nm的光辐射。这两种情况下，被吸收的能量在可见光谱红橙区的590nm处重新发射出来。由于溴化乙锭-DNA复合物的荧光产率比没有结合DNA的染料高出20～30倍，所以当凝胶中含有游离的溴化乙锭（0.5µg/mL）时，可以检测到少至10ng的DNA条带。（1）毒性：溴化乙锭是强诱变剂，具有高致癌性！EB嵌入碱基分子中，导致错配。（2）火灾及爆炸：不可燃。（3）防护：操作时需要在实验室划定的操作区内进行，必须戴手套、穿工作服。EB会在60℃～70℃时蒸发，因此加入凝胶时要待凝胶冷却到60℃以下。
实验结束后，应对含EB的溶液进行净化处理再行弃置，以避免污染环境和危害人体健康。
对于EB含量大于0.5mg/mL的溶液，可做如下处理：①将EB溶液用水稀释至浓度低于0.5mg/mL。②加入一倍体积的0.5mol/L KMnO4，混匀，再加入等量的25mo1/L HC1，混匀，置室温数小时。③加入一倍体积的2.5mo1/L NaOH，混匀并废弃。
EB含量小于0.5mg/mL的溶液可如下处理：①按1mg/mL的量加入活性炭，不时轻摇混匀，室温放置1小时。②用滤纸过滤并将活性炭与滤纸密封后丢弃。
接触过EB的吸头须回收至棕色的玻璃瓶中，定期回收处理。电泳凝胶中EB小于0.1%可以直接扔掉。而如果发红，即大于等于0.1%时，应该放在生物危害柜中焚烧掉。（4）应急处理：眼睛、皮肤接触应立即用大量清水冲洗，必要时就医。（5）贮存：EB粉末贮存于棕色瓶中，室温保存。
3.二乙基焦碳酸酯（DEPC） DEPC可灭活各种蛋白质，是RNA酶的强抑制剂。在RNA的提取操作前要用0.1%DEPC水过夜处理实验中所用的水和各种溶液，然后高温高压20分钟，DEPC即降解成二氧化碳和水。DEPC能与胺和巯基反应，因而含Tris和DTT的试剂不能用DEPC处理。（1）毒性：DEPC是一种潜在的致癌物质，闻起来香香甜甜，主要是能生成乙酯基衍生物和乙酯类衍生物，其中尿烷是一种已知的致癌物质。DEPC有刺激性，对眼睛、气道黏膜有强刺激，吸入的毒性最强。（2）火灾及爆炸：不可燃。（3）防护：操作时应尽量在通风的条件下进行，并避免接触皮肤，戴合适的手套，穿工作服，戴口罩。（4）应急处理：不慎与皮肤、眼睛接触，立即用大量清水冲洗。（5）贮存：2℃～8℃冰箱保存。
4.十二烷基硫酸钠（SDS） SDS是一种阴离子去污剂，作为变性剂能断裂分子内和分子间的氢键，使分子去折叠，破坏蛋白质分子的二级结构和三级结构。在SDSPAGE凝胶电泳样品处理时，加入SDS，100℃加热5分钟，使蛋白质分子解聚为多肽链。工业中为洗洁精的主要成分，作为发泡剂被广泛应用于牙膏、肥皂、浴液、洗发香波、洗衣粉，以及化妆品中。（1）毒性：有毒，对黏膜、上呼吸道、眼和皮肤有刺激作用，可引起呼吸系统过敏性反应。（2）火灾及爆炸：可燃，燃烧后可产生一氧化碳、二氧化碳、硫化物、氧化钠。受高热分解放出有毒的气体。（3）人身防护：实验操作时须戴合适的手套、安全护目镜及口罩，不要吸入其粉末。（4）应急处理：眼睛、皮肤接触，脱去污染的衣着，用大量流动清水冲洗。吸入，脱离现场至空气新鲜处。避免扬尘。（5）贮存：储存于阴凉、通风的库房。远离火种、热源。应与氧化剂分开存放，切忌混储。
5.聚乙二醇辛基苯基醚（Triton×-100） Triton X-100是一种非离子型表面活性剂。免疫细胞化学中，1%的Triton X-100常用于漂洗组织标本，0.3%的Triton X-100则常用于稀释血清。常作为添加剂使蛋白保持稳定，尤其是膜蛋白。（1）毒性：能引起严重的眼睛刺激和灼伤。可因吸入、咽下或皮肤吸收而受害。（2）火灾及爆炸：不可燃。（3）人身防护：操作时戴合适的手套和护目镜。（4）应急处理：接触眼睛、皮肤，立即用流动清水冲洗。（5）贮存：非常稳定，密封避光，在2℃～8℃下可以长期保存。
6.多聚甲醛（1）毒性：对呼吸道有强烈刺激性及致敏作用，可引起鼻咽炎、肺炎和肺水肿。眼部直接接触可致灼伤。对皮肤有刺激性，引起皮肤红肿。长期反复接触引起干燥、皲裂、脱屑。（2）火灾及爆炸：遇明火、高热或与氧化剂接触，有引起燃烧的危险。受热分解放出易燃气体能与空气形成爆炸性混合物。粉末与空气可形成爆炸性混合物，当达到一定浓度时，遇火星会发生爆炸。（3）人身防护：佩戴防尘口罩，必要时佩戴防毒面具，戴安全防护眼镜，穿着相应的防护服，戴防护手套。（4）应急处理：用肥皂水及清水彻底冲洗被污染皮肤。如眼部接触，应立即提起眼睑，用流动清水或生理盐水冲洗至少15分钟。如不慎吸入，应迅速脱离现场至空气新鲜处，保持呼吸道畅通。如果大量泄漏，用水打湿然后收容回收。（5）贮存：存储在阴凉、干燥、通风良好且阳光无法直射的地方。避免加热、接触火焰和火花等。与氧化剂分开存放，且要屏蔽接地。仓储温度≤30℃，保持容器密封。
7.二硫苏糖醇（DTT） DT是一种小分子有机还原剂，常被用于蛋白质保存以及蛋白二硫键的还原，也可作为巯基化DNA的还原剂和去保护剂。DTT或含有DT的溶液不能进行高压处理。（1）毒性：散发难闻的气味。可因吸入、咽下或皮肤吸收而危害健康。（2）火灾及爆炸：不可燃。（3）人身防护：当使用固体或高浓度储存液时，戴手套和护目镜，在通风橱中操作。避免和眼睛及皮肤接触。（4）应急处理：接触眼睛、皮肤，立即用流动清水冲洗。（5）贮存：容易被空气氧化，因此DT的稳定性较差。-20℃冷冻保存。
8.吉姆萨染液（Giemsa） Giemsa染液为天青色素、伊红、次甲蓝的混合物。可用于血液涂片检查。对细胞核染色体染色，在A-T丰富的区段结合率高，通过显微镜可以观察到该区段呈暗带。（1）毒性：染料咽下可致命或引起眼睛失明，通过吸入和皮肤吸收是有毒的。其可能的危险是不可逆的效应。（2）火灾及爆炸：不可燃。（3）人身防护：在化学通风橱里操作，操作时戴合适的手套和安全护目镜。不要吸入其粉末。若吸入，转移至空气新鲜处。（4）应急处理：皮肤接触，立即用大量流动的水冲洗。（5）贮存：室温保存。
9.苯甲基磺酰氟（PMSF） PMSF是一种高强度毒性的胆碱酯酶抑制剂，常用于蛋白质的提取。在水溶液中不稳定，应在使用前现从贮存液中加入裂解缓冲液中。（1）毒性：剧毒，严重损害呼吸道黏膜、眼睛及皮肤，吸入、吞进或通过皮肤吸收后有致命危险。（2）火灾及爆炸：不可燃。（3）人身防护：为了安全和健康，戴合适的手套和安全眼镜，始终在化学通风橱里使用。凡被PMSF污染的衣物应予丢弃。（4）应急处理：一旦眼睛或皮肤接触，应立即用大量水冲洗。（5）贮存：2℃～8℃可以存放数月之久。长期保存，可冻存于-20℃。
10.丙烯酰胺 丙烯酰胺与甲叉双丙烯酰胺常用来制备分离蛋白质及DNA的凝胶。工业上主要用于水的净化处理、纸浆的加工等。淀粉类食品在高温（大于120℃）烹调下容易产生丙烯酰胺。（1）毒性：有毒，可通过皮肤及呼吸道进入人体，主要是引起神经毒性，同时还有生殖、发育毒性。表现为周围神经退行性变化和脑中涉及学习、记忆和其他认知功能部位的退行性变化，还可能致癌。毒性累积，不容易排出。（2）火灾及爆炸：易燃，受高热分解放出腐蚀性气体。（3）人身防护：使用中必须穿戴好防护用具，如防毒服，口罩及手套等。（4）应急处理：皮肤接触，脱去污染的衣着，用肥皂水及清水彻底冲洗。眼睛接触，立即提起眼睑，用流动清水冲洗。吸入，脱离现场至空气新鲜处。（5）贮存：密封，避光，防湿防潮，勿与氧化剂、还原剂一起存放。
11.N，N-亚甲基双丙烯酰胺（甲叉双丙烯酰胺） 可用作制备聚丙烯酰胺凝胶的交联剂，用于生物高分子化合物（蛋白质、多肽、核酸）的分离。（1）毒性：具有一定的毒性。能轻微刺激眼睛、皮肤和黏膜。影响中枢神经系统，切勿吸入粉末。（2）火灾及爆炸：不可燃。（3）人身防护：使用中必须穿戴好防护服，口罩及手套等。（4）应急处理：皮肤、眼睛接触，立即用大量流动的清水冲洗。吸入，脱离现场至空气新鲜处。（5）贮存：2℃～8℃，避免与氧化物、光、酸、还原剂、碱、热接触。光照后可能聚合。第三节 实验室常用设备设施使用安全一、实验室用电安全
电是引发实验室火灾最主要的因素，包括电线老化、破损、接线错误、超负荷用电、漏电、短路、自行更换大功率的保险丝等，都可导致电器火灾的发生，因此，用电安全是实验室安全的重要内容。应注意以下几个方面：
1.线路安全 ①供电线路所承载电流应符合电器功率要求。②经常检查电线、插头及插线板的情况，发现有安全隐患马上处理。③禁止自行接线，更不允许更换大功率的保险丝。
2.使用安全 ①大功率电器一定要使用专用插座，因大功率电器易引起火花损坏仪器。②大功率电器周围不要有易燃物，大功率照明或取暖设备易引燃周围可燃物而发生火灾。③停电时要切断正在运行仪器的电源，以防来电时引发火灾。④实验完毕后要及时关闭电源，尤其是假期或夏季。⑤插线板、充电器上严禁覆盖物品。
3.火灾处理 ①出现灾情马上报告校医院、保卫处，同时拨打119电话报警。②对于初起火灾，及时切断电源，在保证安全的前提下灭火。如果火势过大无法扑灭，则设法隔离火源，防止火势蔓延，等待专业消防人员来灭火。③做好人员疏散工作。火灾时，一旦人身体上着火，应尽快地把衣服撕碎扔掉，切记不能奔跑，如旁边有水，立即用水浇洒全身，或用灭火毯等压灭火焰，着火人也可就地倒下打滚，把身上的火焰压灭。④消防车到来后，由专人负责引导消防人员到起火点，并积极协助灭火。二、常用设备使用安全
冰箱、烘箱、气体钢瓶、双蒸水蒸馏器、高压灭菌器等是医学实验室常用设备，这些设备使用不当会引起爆炸而导致人员伤亡。因此，使用上述设备时要注意以下几点：（一）冰箱使用注意事项
由于冰箱的继电器启动会产生电火花，因此普通冰箱内不得存放挥发性易燃易爆类试剂，如乙醚、石油醚等。挥发性易燃易爆类试剂如果必须存放冰箱，则必须选用专门的防爆冰箱存放，同时注意试剂瓶要密封，平稳放置。当发现冰箱周围有易爆气体时，应立即切断冰箱电源。（二）烘箱使用注意事项
1.使用安全 ①普通烘箱不允许烘干挥发性易燃物品，如要烘干挥发性易燃物品，必须使用防爆烘箱。②烘箱内物品摆放不能过满，同时要开启鼓风机。③当烘箱进行高温烘烤时，严禁直接打开玻璃内门，以防玻璃制品遇冷炸裂。④如果用烘箱进行干热灭菌，不得用纸或棉布包裹器皿，防止燃烧。⑤烘箱不能过夜使用。如石蜡包埋实验，离开前要关掉烘箱。
2.火灾处理 如果烘箱内发生火灾，应先关闭电源，视情况待其自然熄灭（氧气缺乏时，烘箱内的火焰会自然熄灭）。不要贸然打开烘箱门，进入烘箱的新鲜空气有助于物品燃烧。同时依情况启动应急预案。（三）气体钢瓶使用注意事项
1.存放检查 ①应经常检查钢瓶，特别是氢气钢瓶是否泄漏。②注意检查气体钢瓶的使用年限，过期钢瓶要报废。③钢瓶上原有的各种标记、刻印等一律不得去除。
2.使用安全 ①所有气体钢瓶必须装有调压阀。②氧气钢瓶的调压阀、阀门及气体管路上禁止涂抹油类或脂类。③不得将钢瓶完全用空（尤其是乙炔、氢气、氧气钢瓶），必须留存一定的正压力，并且将阀门关紧，套上安全帽，以防阀门受损。④钢瓶不得放于走廊与门厅，以防紧急疏散时受阻及其他事件的发生。
3.回收 空的或不再使用的钢瓶应归还气体仓库。（四）双蒸水蒸馏器使用注意事项
1.使用前检查 检查蒸馏器的水流进出口处连接是否牢固，有无松脱、漏水现象，上、下水是否通畅。输水管必须用橡胶管，不得使用乳胶管。
2.使用安全 ①制备蒸馏水一定要有人员在场并不时巡视，根据水流变化及出水温度及时调整进水速度。②停水、停电时要立即关闭水源、电源。③如果加热丝烧红，应立即关闭电源，使其自然冷却，禁止加入冷水或将其移放在实验台面上。④进行蒸馏时，体系中须加沸石，同时操作人员不得擅自离开实验操作台。⑤如果出水口胶管没插好，因漏水而淹没地面时，应注意检查是否有电器浸入水中，必要时处理水灾前要先切断电源。（五）高压灭菌器使用注意事项（高压灭菌器使用注意事项请参见本指导第二章第六节。）三、玻璃器皿使用安全
实验操作中经常使用玻璃器皿，尤其是要加热处理或盛放液体时。在使用中应注意以下几点：
1.使用前 玻璃仪器使用前要仔细检查有无破裂，上沿破损的烧杯、量筒等应及时丢弃。
2.拆装玻璃器皿 ①玻璃管与乳胶管、胶塞等拆（装）时，极易断裂而扎伤。应先用水或润滑油润湿玻璃管，再垫上毛巾，缓慢旋转插入或拔出。②对黏结在一起的玻璃器皿，不要试图徒手拉开，以免受伤。
3.加热玻璃器皿 ①烧杯、三角瓶等须加热时，应垫石棉网，内容物不得超过容积的2/3。②量筒等玻璃量器不能加热。③不要将加热后的玻璃器皿放在冷的实验台面上，以防温度急剧变化而引起器皿破碎。
4.其他 ①在进行减压蒸馏时，应当采用适当的保护措施（如有机玻璃挡板），防止玻璃器皿发生爆炸或破裂而造成人员受伤。②由于碱性溶液对玻璃有腐蚀作用，玻璃试剂瓶不能长时间存放碱液。③填装层析柱时，加水膨胀的材料（如填装大孔树脂层析柱），禁止加满，以免玻璃炸裂。第二章 实验室常用仪器第一节 天 平
天平是用来称量物质质量的仪器，在医学教学、科研中被广泛应用。天平有狭义和广义之分。狭义的天平专指双盘等臂机械天平，是利用等臂杠杆平衡原理，将被测物与相应砝码比较衡量，从而确定被测物质质量的一种衡器。广义的天平则包括双盘等臂机械天平、单盘不等臂机械天平和电子天平三类。一、托盘天平（一）基本介绍
托盘天平属于双盘等臂机械天平，由托盘、横梁、平衡螺母、刻度尺、指针、刀口、底座、标尺、游码、砝码等组成（图2-1）。由支点在梁的中心支撑天平梁而形成两个臂，每个臂上托着一个托盘。固定在梁上的指针在不摆动且指向正中刻度时或左右摆动幅度较小且相等时，砝码重量与游码位置示数之和就指示出待称重物体的质量。
托盘天平在称量物品质量中的应用较少，一般用来平衡两个物品的重量，例如离心之前的离心管配平。图2-1 托盘天平（二）操作规程
1.游码归零 将天平放在水平面上，用镊子将游码拨到标尺左端的零刻度线处。
2.调节水平 调节横梁左右端的平衡螺母，使指针指在分度盘中线处。
3.称量 将被测物体放在左盘，估计被测物体的质量后，用镊子向右盘按由大到小的顺序加减砝码，并适当移动游码的位置，直到指针指在分度盘中线处。
4.读数 被测物体的质量等于右盘所有砝码的总和加上游码对应的刻度值。
5.归位 称量完毕，将砝码放回砝码盒，并将游码归零。（三）注意事项
1.使用前 天平使用前观察游码是否在0刻度线，并调节平衡螺母，使天平左右平衡。
2.使用时 ①右放砝码，左放物体。②砝码不能用手拿，要用镊子夹取。③过冷过热的物体不可放在天平上称量。④加砝码应该从大到小，可以节省时间。⑤称量化学药品时，应在两侧托盘上放置大小相同并等质的称量纸，以防污染托盘。⑥离心管配平时，注意游码应在0刻度线。
3.计量 ①架盘天平的精度为0.1g。②物体的质量=砝码的总质量+游码在标尺上所对的刻度值。二、电子分析天平（一）基本介绍
电子天平是基于电磁学原理制造的新一代天平，采用了电磁力自动补偿电路原理（图2-2）。当秤盘加载时，电磁力会将秤盘推回到原来的位置，使电磁力与被称物的重力平衡。图2-2 电子分析天平
一般的电子天平装有电脑，具有数字显示、自动调零、自动校正、扣除皮重、输出打印等功能，有数字显示、反应灵敏、快速清晰等特点。（二）操作规程
1.调节水平 通过两个水平调节脚，将水平气泡调节至内圈中央。
2.开机 打开电源，并预热至说明书中建议的时间。
3.天平校准 有自动校准功能的电子天平，需要自动校准。
4.称量 放入称量纸或其他空容器，去皮。待天平数值显示稳定后再加入被称量物品，显示净重。
5.关机 关机后清洁天平。（三）注意事项
1.使用前 ①电子天平放置在指定位置，不要随意搬动。搬动后的电子天平必须重新校正水平。观察水平指示气泡是否在内圈中央。②事先检查电源电压是否匹配，按仪器要求通电预热至所需时间。
2.使用时 ①称量吸湿性、挥发性或腐蚀性物品时，应盖紧称量瓶称量。②不能将化学药品直接放到秤盘上。根据所称物品量的多少，可放入称量纸或其他空容器。③对于精密天平，为了称量准确，在观察数值时应关闭天平玻璃侧门。④注意天平的量程，不要超量程称量。
3.使用后 称量后要及时用毛刷清洁电子天平内的遗洒物。第二节 离心机一、基本介绍
离心机是利用离心力分离液体与固体或液体与液体的混合物中各组分的仪器（图2-3）。由于不同物质的质量、密度、大小、形状等各不相同，在同一固定大小的离心场中沉降速度也就不同，因此可以得到相互间的分离。图2-3 离心机
离心机根据转速分为：低速离心机，转速在10000rpm；高速离心机，转速在10000～30000rpm或RCF在15000～70000g；超速离心机，转速在30000rpm或70000g以上。根据有无冷冻分为：冷冻离心机（低温离心机）和常温离心机。
离心的速度有两种表示方法，其一是以每分钟多少转（rpm）表示，另外一种是以相对离心力（RCF）表示，也即地心引力的倍数，称作“多少g”。在一定转头半径的情况下，rpm与RCF可相互换算。二、操作规程
1.开机 接通电源，打开离心机盖。
2.配平 配平所需离心的样品，对称放入转头。
3.设置 设定离心时间及转速。低速离心机的转速应由低向高逐渐增加，直至所需转速。
4.启动 启动离心机。
5.停止 离心机完全停止后再打开盖子，取出样品。三、注意事项
1.使用前 ①离心机应放在坚固的水平台面上，要用水平仪测水平，距墙10cm以上，并保持良好的通风环境。②更换转子后一定要注意拧紧转子。
2.使用时 ①任何规格的离心机在使用时，样品的放置必须对称，必要时须用天平配平后再对称放入。②离心前要注意离心机内、外盖都要盖好。③设定的离心力不要超过转子的最高转速、超过离心管的承受力。④离心机严禁不加转头空转。⑤按下开始键后不要马上离开，转速达到设定值后，观察未出现异常情况再离开。⑥若有异常应及时停止，检查原因。⑦若离心管破裂，要及时清理漏在孔里的液体。
3.使用后 ①离心结束时，必须等离心机停止运转后才能打开盖子，严禁在离心机运转时打开盖子或用手触摸离心机的转动部分。②冷冻离心机使用中，内壁会有冰霜产生，因此离心结束后要敞开机盖融化，并用干净棉布擦干，再盖上盖子。第三节 分光光度计一、基本介绍
分光光度计是利用分光光度法，通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度，对该物质进行定性和定量分析（图2-4）。图2-4 分光光度计
比色分析法是通过比较有色溶液颜色的深浅来测知该溶液浓度的方法。有些被检测物质的溶液本身就具有颜色，而有些溶液虽不具有颜色，但可于试样中加入某种适宜的试剂，使其产生有色化合物。其颜色的深浅与试样中该化学成分的含量成正比。借助于分光光度计将未知含量的有色溶液与已知含量的有色标准溶液进行比色，通过计算就可求出未知溶液的含量。其基本原理即根据Lambert定律和Beer定律，比色分析法的计算公式亦根据此二定律推导而得。
根据分光元件的不同，分为棱镜式和光栅式分光光度计；根据仪器结构分为单光束、准双光束、双光束和双波长分光光度计；根据光源发射的光线波长不同分为可见光、紫外-可见光、红外、荧光、原子吸收光和火焰分光光度计等。二、操作规程
以实验室常用的722型分光光度计为例，介绍基本操作规程。722型分光光度计所使用的光为可见光，波长为330～800nm。操作步骤如下：
1.开机 接通电源，打开开关，预热30分钟。
2.预备 准备好滤纸、擦镜纸、废液杯及洗瓶，放一旁备用。
3.设置 选择合适的波长。
4.进样 将样品依次倒入4个比色杯中（第一个为空白对照），放入比色槽内。
5.调零 把拉杆放在第一档的位置，将“模式”按钮按至“透射比”档，在比色槽盖打开的时候，按“0%”调0，盖上比色槽盖后按“100%”调100。
6.测量 将“模式”按钮按至“吸光度”档，拉动拉杆，依次读出2、3、4档的吸光度值。比色一次完毕，将“吸光度”调至“透射比”档，打开比色槽盖。如仍有样品，将2、3、4比色杯中样品倒掉，用蒸馏水清洗3次，每次都将比色杯在滤纸上倒置数秒，再加入新的样品。
7.清洗 所有样品测量完毕，将比色杯用蒸馏水冲洗干净，倒置于滤纸上晾干，以备下次使用。
8.关机 关闭仪器的开关，拔掉电源。三、注意事项
1.测定时，手只能接触比色杯的毛面。
2.注意比色杯中的溶液适量，防止过多溢出。
3.比色的空闲时间，将比色槽盖打开，以免使仪器疲劳工作。第四节 pH计一、基本介绍
pH计是一种常用的仪器设备，主要用来精密测量液体介质的酸碱度值（图2-5）。根据仪器的体积分为笔式（迷你式）、便携式、台式及在线连接监控测量的在线式；根据测量精度分为0.2级、0.1级、0.01级和0.001级，数字越小精度越高；根据读数指示方式分为指针式和数字式。图2-5 pH计二、操作规程
1.标定pH6.86标准值 将复合电极用去离子水冲洗干净，并用滤纸吸干。将pH6.86标准溶液2～5mL倒入已用水洗净并晾干的塑料烧杯中，洗涤烧杯和复合电极后倒掉，再加入20mL pH6.86标准溶液于塑料烧杯中，将复合电极插入溶液中，用仪器定位旋钮，调至读数6.86，直到稳定。
2.设置温度补偿 将复合电极用去离子水洗净，用滤纸吸干，用温度计测量pH4.00溶液的温度，并将仪器温度补偿旋钮调到所测的温度值下。
3.标定pH4.00标准值及斜率 将pH4.00标准溶液2～5mL倒入另一个塑料烧杯中，洗涤烧杯和复合电极后倒掉，再加入20mL pH4.00标准溶液，将复合电极插入溶液中，读数稳定后，用斜率旋钮调至pH4.00。应该注意斜率旋钮调完后，决不能再动。
4.测温 用温度计测定待测液温度，并将仪器温度补偿调至所测温度。
5.读数 将复合电极插入待测溶液中，读取pH值，即为待测液pH值。三、注意事项
1.使用前 ①一般情况下，pH计在连续使用时，每天要标定一次，一般在24小时内仪器不需再标定。标定的缓冲溶液一般第一次用pH6.86的溶液，第二次用接近被测溶液pH值的缓冲液，如被测溶液为酸性时，缓冲液应选pH4.00；如被测溶液为碱性时则选pH9. 18的缓冲液。②配制pH6.86和pH9.18的缓冲液所用的水，应预先煮沸15～30分钟，除去溶解的二氧化碳。在冷却过程中应避免与空气接触，以防止二氧化碳的污染。
2.使用时 ①pH计在进行pH值测量时，要保证电极的球泡完全浸入到被测量介质内，这样才能获得更加准确的测量结果。②待测溶液滴加酸或碱后，必须混合均匀再进行测量。③测定时温度不能过高，如超过40℃测定结果不准，须用烧杯取出稍冷。
3.维护 ①pH计所使用的电极如为新电极或长期未使用过的电极，则在使用前必须用蒸馏水进行数小时的浸泡，这样pH计电极的不对称电位可以被降低到稳定水平，从而降低电极的内阻。②保持电极球泡的湿润，如果发现干枯，在使用前应在3mol/L氯化钾溶液或微酸性的溶液中浸泡几小时，以降低电极的不对称电位。③复合电极避免和有机物接触，一旦接触或沾污要用无水乙醇清洗干净。第五节 吸量管与移液器一、吸量管（一）基本介绍
吸量管是实验室中最常用的器具之一（图2-6）。常用的吸量管有三类，奥氏吸量管，此种吸量管只有一个刻度，当放出所量液体时，管尖余留的液体必须吹入容器内；移液管，也只有一个刻度，放液时量取液体自然流出，管尖要在容器内壁停留15秒，管尖的残余液体不要吹出；刻度吸量管，此种吸量管若为“吹出式”，则要吹出管尖液体，在吸量管上端标有“吹”字，否则不必吹出。图2-6 刻度吸量管（二）操作规程
1.选择 使用吸量管时先要看清楚刻度，选择适当容量的吸量管（等于或略大于需要的毫升数）。
2.拿取 拿吸量管时，标有刻度的一面要向着自己，以便于读取刻度。用右手中指和拇指拿住吸量管上部，把吸量管的尖端插入要吸取的溶液中。
3.吸液 左手持吸耳球把容器内液体吸至刻度上方时，立即用右手食指按住吸量管管口，以稳住吸量管内的液面。
4.调整 提起吸量管以管尖端接触容器内壁，慢慢放松食指，使吸量管内液面的弯月面最低点下降至所需的刻度处，立即用食指堵紧。
5.加液 提起吸量管离开容器，然后将吸量管移到须加液体的容器中，让其尖端与容器内壁靠紧，松开食指让液体流出。液体流完后再等15秒，捻动一下吸量管后移去。如标明吹的吸量管，则吹出尖端的液体，再捻转一下吸量管后移去。（三）注意事项
1.吸取液体时，不能用力过猛，以免将液体吸入吸耳球内。
2.观察液面时，眼睛与刻度线要处于同一水平面上。
3.不能用嘴吸或吹吸量管。二、移液器（一）基本介绍
定量移液器是吸量管的革新产品，由塑料制成，它具有以下特点：使用方便，取、加样迅速，计量准确，不易破损，能吸取多种样品（只换取吸头即可）。定量移液器有两种类型：
1.固定式 只能吸取一定容量，不能调节，其规格有10µL、20µL、25µL、30µL、50µL、100µL、200µL、250µL、300µL、400µL、500µL、1000µL等。
2.可调式 在一定容量范围内可根据需要调节取量、加量。例如10～200µL等（图2-7）。图2-7 可调式移液器（二）操作规程
1.调整 选取合适量程的移液器，将容量刻度调至所需数值。然后把吸嘴套在吸引管上，套上后要轻轻地旋紧一下，以保证接合严密。
2.吸液 用大拇指按下按钮到第一停止点，把吸头尖浸入取样液内，徐徐松开大拇指，让按钮慢慢自行复原，即完成取样。
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