作者：汪明阳
出版社：湖北科学技术出版社
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牛人工授精技术手册试读：
前言
随着我国农业机械化水平的不断提高，牛的使役作用逐渐下降，发展商品肉牛生产，对新时期农业经济结构的调整，提高农民经济效益显得十分必要。
湖北省从1976年开始开展牛冷冻精液人工授精工作，使肉牛生产有了较快的发展。为了适应广大农民、基层兽医和牛人工授精员的需要，我们根据多年的生产实践经验，编写了这本手册，供大家在实践工作中参考。由于时间仓促，错误难免，欢迎广大读者对本书内容提供宝贵意见，以便不断改进和提高。编者2006年11月
一、品种介绍
我国引入的主要肉牛品种——夏洛莱牛、利木赞牛、海福特牛、安格斯牛、劳来恩牛、西门塔尔牛、尼里/拉菲水牛、摩拉水牛。（一）夏洛莱牛（彩图1）
1．原产地及分布夏洛来牛原产于法国中西部到东南部的夏洛来省和涅夫勒地区，是举世闻名的大型肉牛品种，自育成以来就以其生长快、肉量多、体型大、耐粗放而受到国际市场的广泛欢迎，早已输往世界许多国家，参与新型肉牛杂交育种，或在引入国进行纯种繁殖。2．外貌特征
该牛最显著的特点是被毛为白色或乳白色，皮肤常有色斑；全身肌肉特别发达；骨骼结实，四肢强壮。夏洛来牛头小而宽，角圆而较长，并向前方伸展，角质蜡黄、颈粗短，胸宽深，肋骨方圆，背宽肉厚，体躯呈圆筒状，肌肉丰满，后臀肌肉很发达，并向后和侧面突出。成年牛体重为：公牛平均为1100～1200千克，母牛700～800千克。3．生产性能
夏洛来牛在生产性能方面表现出的最显著特点是：生长速度快，瘦肉产量高。在良好的饲养条件下，6月龄公犊可达250千克，母犊210千克，日增重可达1400克。在加拿大，良好饲养条件下的周岁公牛可达511千克。该牛作为专门化大型肉用牛，产肉性能好，屠宰率一般为60%～70%，胴体瘦肉率为80%～85%。16月龄的育肥母牛胴体重达418千克，屠宰率66.3%。夏洛来母牛泌乳量较高，一个泌乳期可产奶2000千克，乳脂率为4.0%～4.7%，但该牛纯种繁殖时难产率较高，达13.7%。4．与我国黄牛杂交效果（彩图2）
我国在1964年和1974年，先后两次直接由法国引进夏洛来牛，分布在东北、西北和南方部分地区，用该品种与我国本地牛杂交来改良黄牛，取得了明显效果。表现为夏杂后代体格明显加大，生长速度加快，杂种优势明显。湖北省于1997年开始引进，杂交效果非常明显，很受农民欢迎。
（二）利木赞牛（彩图3）
1．原产地及分布利木赞牛原产于法国中部的利木赞高原，并因此得名。在法国，其主要分布在中部和南部的广大地区，数量仅次于夏洛来牛，育成后于20世纪70年代初，输入欧美各国，现在世界上许多国家都有该牛分布，属于专门化的大型肉牛品种。2．外貌特征
利木赞牛毛色为红色或黄色，口、鼻、眼睑田周围和四肢内侧及尾帚毛色较浅，角为白色，蹄为红褐色。头较短小，额宽，胸部宽深，体躯较长，后躯肌肉丰满，四肢粗短。平均成年体重：公牛1100千克、母牛600千克。在法国较好饲养条件下，公牛体重可达1200～1500千克，母牛达600～800千克。3．生产性能
利木赞牛产肉性能高，胴体质量好，眼肌面积大，前后肢肌肉丰满，出肉率高，在肉牛市场上很有竞争力。集约饲养条件下，犊牛断奶后生长很快，10月龄体重即达408千克，周岁时体重可达480千克左右，哺乳期平均日增重为0.86～1.0千克。该牛在8月龄时就可生产出具有大理石纹的牛肉。因此，利木赞牛是法国等一些欧洲国家生产牛肉的主要品种。4．与我国黄牛杂交效果
1974年和1993年，我国数次从法国引入利木赞牛，在河南、山东、内蒙古等地改良当地黄牛。利杂牛体型改善，肉用特征明显，生长强度增大，杂种优势明显。目前，黑龙江、山东、安徽为主要供种区，全国供种不足，现有改良牛45万头。
（三）海福特牛
1．原产地及分布海福特牛原产于英格兰西部的海福特郡，是世界上最古老的中小型早熟肉牛品种，现分布于世界上许多国家。2．外貌特征
具有典型的肉用牛体型，分为有角和无角两种。颈粗短，体躯肌肉丰满，呈圆筒状，背腰宽平，臀部宽厚，肌肉发达，四肢短粗，侧望体躯呈矩形。全身被毛除头、颈垂、腹下、四肢下部以及尾尖为白色外，其余均为红色，皮肤为橙黄色，角为蜡黄色或白色。3．生产性能
海福特牛体重：成年母牛平均520～620千克，公牛900～1100千克；犊牛初生重28～34千克。该牛7～18月龄的平均日增重为0.8～1.3千克；良好饲养条件下，7～12月龄平均日增重可达1.4千克以上。据载，加拿大一头公牛，育肥期日增重高达2.77千克。屠宰率一般为60%～65%,18月龄公牛体重可达500千克以上。
该品种牛适应性好，在干旱高原牧场冬季严寒（-48～-50℃）的条件下，或夏季酷暑（38～40℃）条件下，都可以放牧饲养和正常生活繁殖，表现出良好的适应性和生产性能。4．与我国黄牛杂交效果
我国在1913年、1965年曾陆续从美国引进该牛，现已分布于我国东北、西北广大地区，总数有400余头。各地用其与本地黄牛杂交，海杂牛一般表现体格加大，体型改善，宽度提高明显；犊牛生长快，抗病耐寒，适应性好，体躯被毛为红色，但头、腹下和四肢部位多有白毛。
（四）安格斯牛（彩图4）
1．原产地及分布安格斯牛属于古老的小型肉牛品种。原产于英国的阿伯丁、安格斯和金卡丁等郡，并因地得名。目前世界多数国家都有该品种牛。2．外貌特征
安格斯牛以被毛黑色和无角为其重要特征，故也称其为无角黑牛。该牛体躯低矮、结实，头小而方，额宽，体躯宽深，呈圆筒形，四肢短而直，前后档较宽，全身肌肉丰满，具有现代肉牛的典型体型。安格斯牛成年公牛平均体重700～900千克，母牛500～600千克，犊牛平均初生重25～32千克，成年体高公母牛分别为130.8厘米和118.9厘米。3．生产性能
安格斯牛具有良好的肉用性能，被认为是世界上专门化肉牛品种中的典型品种之一。表现早熟，胴体品质高，出肉多。屠宰率一般为60%～65%，哺乳期日增重900～1000克。育肥期日增重（1.5岁以内）平均0.7～0.9千克。肌肉大理石纹很好。
该牛适应性强，耐寒抗病。缺点是母牛稍具神经质。
（五）劳来恩牛（彩图5）
1．原产地及分布劳来恩牛又称澳洲矮脚牛，原产于澳大利亚，具有适应性强，耐粗饲，易饲养，饲料报酬高，生长速度快等优点。2．外貌特征
劳来恩牛体型矮小，全身被毛黑色，公牛颈部被毛有波浪状卷曲，头笨重，母牛稍清秀，颜面较短嘴宽大，舌前部也呈黑色，两眼大而有神，眼珠蓝色；脖颈粗短，耆甲稍高，颈肩结合良好，胸宽深，肋骨开张，背腰宽广而平直，腹部紧缩不下垂，尻部圆润丰满；四肢短而粗壮，蹄大、结实。澳洲矮脚牛成年公牛平均体重600千克，母牛平均体重400千克；公牛平均初生重23千克，母牛平均初生重20.5千克；公牛周岁重275千克，母牛周岁重205千克；成年体高公母牛分别为130.8厘米和118.9厘米。3．生产性能
劳来恩牛因体型矮小，维持需要少，饲料报酬高，胴体丰满，而且肉质好，特别适合于快速生产高档牛肉，其屠宰率为56%～60%，净肉率高达70%。
该牛抗病力、适应力很强，耐粗饲，性情温驯，易于饲养管理。4．与我国黄牛杂交效果
杂交一代被毛初生时为黄色或近黑色，周岁左右开始换毛成为黑色，体格较短小，背宽腰圆，尻部肌肉丰满，肉用性能良好，杂交优势明显，是理想的杂交父本。
（六）西门塔尔牛（彩图6）
1．原产地及分布西门塔尔牛原产于瑞士西部的阿尔卑斯山区，主要产地为西门塔尔平原和萨能平原。西门塔尔牛占瑞士全国牛只的50%，在奥地利占63%，现已分布到很多国家，成为世界上分布最广，数量最多的乳、肉、役兼用品种之一。2．外貌特征
该牛毛色为黄白花或红白花，头、胸、腹下、四肢及尾帚多为白色，皮肤为粉红色。头较长，面宽，角较细而向外上方弯曲，尖端稍向上，颈长中等。体躯长，呈圆筒状，肌肉丰满，前躯较后躯发育好，胸深，尻宽平，四肢结实，大腿肌肉发达，乳房发育好。成年公牛体重平均为800～1200千克，母牛650～800千克。3．生产性能
西门塔尔牛乳、肉用性能均较好，平均产奶量为4070千克，乳脂率3.9%。在欧洲良种登记牛中，年产奶4540千克者约占20%。该牛生长速度较快，平均日增重可达1.0千克以上，生长速度与其他大型肉用品种相近。胴体肉多，脂肪少而分布均匀，公牛育肥后屠宰率可达65%左右。
成年母牛难产率低，适应性强，耐粗放管理。总之，该牛是兼乳用牛和肉用牛特点的典型品种。4．与我国黄牛杂交的效果（彩图7）
我国自20世纪初就开始引入西门塔尔牛，到1981年我国已有纯种西门塔尔牛3000余头，杂交种50余万头。西门塔尔牛改良各地的黄牛，都取得了比较理想的效果。据河南省舞钢市报道，西杂一代牛的初生重为33千克，本地牛仅为23千克；平均日增重，杂种牛6月龄为608.09克，18月龄为519.9克，本地牛相应为368.85克和343.24克；6月龄和18月龄体重，杂种牛分别为144.28千克和317.38千克，而本地牛相应为90.13千克和210.75千克。
在产奶性能上，从全国商品牛基地县的统计资料来看，207天的泌乳量，西杂一代为1818千克，西杂二代为2121.5千克，西杂三代为2230.5千克。
（七）摩拉水牛（彩图8）
1．原产地及分布摩拉水牛原产于印度的雅么纳河西部，俗称印度水牛。1957年引进我国，我国南方各省均有饲养。现广泛的分布于广西、湖南、广东、四川、安徽、湖北、云南、江苏、河南、江西、陕西、贵州、福建、浙江等地。摩拉水牛抗病能力强，耐粗饲，少有疾病发生。2．外貌特征
摩拉水牛体形高大，四肢粗壮，体型呈楔型，尻扁斜，皮薄而软，富光泽，被毛稀疏，皮肤被毛黝黑，少数为棕色或褐灰色，尾帚白色或黑色，头较小，前额稍微突出，角如绵羊角，呈螺旋型，耳薄下垂，胸深宽发育良好，蹄质坚实。母牛乳房发育良好，乳静脉弯曲明显，乳头粗长。成年牛平均体高132.8厘米，成年公牛体重450～800千克、母牛体重350～750千克。3．生产性能
摩拉水牛是较好的乳用水牛品种，年平均产奶量2200～3000千克，乳脂率7.6%。我国于1957年从印度引进的摩拉水牛，经过多年的驯化，已适应我国南方地区的气候条件，并保持了原有的生产水平。经广西水牛研究所测定，摩拉水牛泌乳期平均产奶量1900千克，它与我国本地水牛杂交的杂种较本地水牛体型大，生产发育快，役力强，产奶量高。
该牛具有耐粗饲，耐热，抗病能力强，繁殖率高，遗传稳定的优点，但集群性强，性较敏感，下奶稍难。宜在水源多的地方饲养。4．与我国水牛杂交效果
用摩拉水牛与本地水牛进行杂交，可大幅度提高杂交后代的生产性能。我国本地水牛泌乳期产奶量约700千克，摩杂一代水牛平均泌乳期产奶量1400～1600千克，三品杂或二代杂可达1900千克，优秀个体305天产奶量达3800千克，高峰泌乳日达19.5千克。杂种公水牛2岁达400～500千克，经肥育的青年公牛屠宰率为52%，净肉率达43%，产肉量是本地同龄水牛的2倍。
（八）尼里/拉菲水牛（彩图9）
1．原产地及分布尼里/拉菲水牛简称尼里牛。原产于巴基斯坦的萨特里基沿河岸，是巴基斯坦较好的乳用水牛品种。1974年周总理访问巴基斯坦时，布托总理赠送周总理50头尼里水牛，分别饲养在广西和湖北两地。经过20多年的引种观察，已纯繁了不少后代，在两地都认为尼里牛不亚于摩拉品种，对南方各省亚热带环境条件能较好适应，并用来杂交改良本地水牛，取得显著效果。2．外貌特征
尼里/拉菲水牛外貌近似摩拉，皮肤、被毛通常是黑色。其特征玉石眼（虹膜缺乏色素），六端白（前额、四肢、尾帚），并被认为这些特征是理想性状。该品种水牛角短，角基粗，向基部下后方卷曲（螺旋角），体躯深厚，中躯桶状，躯架低，头长，在上1/3处突出，但在两眼窝间下凹，鼻梁和前额骨突起，鼻孔开张，眼突，母牛尤甚。前躯较窄，后躯宽广，乳房发达，乳头长而分布均匀，乳静脉明显。体躯侧望略呈楔形。尼里成年公牛体重为850～1000千克，成年母牛为550～700千克，高的可达900千克。3．生产性能
尼里/拉菲水牛以产奶量高而闻名。305天泌乳期平均产奶量为2000～2700千克，高者可达3200～4000千克。乳脂率为6.9%。在我国广西，平均泌乳期为268天，产奶量为1868千克，乳脂率为6.8%。4．与我国黄牛杂交效果
用尼里水牛进行杂交改良本地水牛杂交效果明显，杂交牛有性情温顺，肌肉丰满和产肉率高等特点。11月龄杂交公犊在半放牧条件下，肥育至14个月龄时屠宰，平均日增重可达0.9千克，屠宰率达62.25%，净肉率49.35%，骨肉比1∶3.5，役用力强，挽力大，易调教，是目前湖北省水牛改良的主要品种之一。
二、人工授精技术
（一）牛冷冻精液和人工授精简介
动物人工授精是一种配种方法。在人为条件下将雄性动物的精液收集，对精液进行适当处理，再将之输送到发情雌性动物的阴道或子宫内，使之受孕产仔。它已有两个多世纪的历史。
湖北省采用人工授精技术改良黄牛在20世纪60年代才起步。从1973年开始，在农业部的组织领导和协调下，揭开了本地黄牛杂交改良和冷冻精液人工授精的历史新篇章。1974年，湖北省筹建了牲畜品种改良站，试验推广用肉用品种公牛的颗粒冷冻精液改良本地黄牛。20多年来，取得了明显的效果。杂交的改良面不断扩大，受胎产犊率不断提高。杂交改良的黄牛，表现出杂交优势，生长快，产肉性能提高，产值大幅度增加，创造了良好的经济效益。
采用冷冻精液人工授精技术大大地提高了优良种公牛的繁殖效能。一头优良种公牛每年可配2万～5万头母牛。精液的长时间保存，配种再不受时间和空间的限制。畜牧学家将冷冻精液人工授精看成是伟大的技术革命，是20世纪畜牧业中最伟大的创举。
（二）牛精液的冷冻贮存和制冷剂简介
离体的牛精子异化大于同化，贮存精液就是要减少精子本身的能量消耗。通过采用降低精子新陈代谢强度的方法，控制温度和使精子保持在一定的酸性基液中都能使精子进入“低温假死”和“酸假死”状态，可以将离体后的精子在短期内（2～5天）保持正常的受精能力。
牛精液经过特殊处理，精子形成“玻璃化”冷冻，可进入“超低温假死”状态，最大限度地降低精子的新陈代谢，能较长时间保持精子的正常受精力。
超低温一般指-60～-250℃的温度区。早期保存冷冻精液采用过干冰（-79℃）。由于使用干冰时，精液仍可能形成冰结晶，危及精子寿命。所以后来都使用温度更低的液态氮。
液氮无色、无臭、透明如水，对精子没有毒力。使用上也比较安全。同时，空气中氮含量很高（78.09%），易于取制。液氮的沸点为-195.8～-196℃，超低温性能良好，极有利于保存精子寿命及其受精力。
液氮是从空气压缩冷却制取的，当温度上升和压力解除时，它立即膨胀气化。液氮气化时，每千克吸热48大卡。液氮大量气化时可使空气中的氧浓度相对降低，在透气不良的环境，可造成工作人员缺氧。应用容器盛装液氮时，不可密封，否则有因膨胀造成的危险。一旦液氮溅到工作人员体表，应立即用水冲洗。
（三）湖北省牛冻精的生产流程
牛精液冷冻是英国人Polge等1949年发明的。1962年，日本人永濑等发明了颗粒冷冻，将经过处理的精液用干冰或液氮作制冷剂，快速冷冻使精液成为浓缩状颗粒。1964年，法国学者公布了Cassou塑料细管冷冻牛精液的效果，使冷冻精液生产又上了一个台阶，被世界各国广泛采用。
我们根据有关文献资料和自己的试验研究，制订了自己的牛颗粒冻精生产流程。整套生产流程包括：采精→稀释→降温平衡→滴冻→贮存→分送出站。每个环节制订了必要的质量检查内容和相应的操作规程，以确保生产的公牛颗粒冻精符合基层单位使用的需求。1997年，我们又从法国卡苏公司CIMV公司引进了电脑控制的全自动冷冻精液细管分装机组一套，开始生产细管冷冻精液。牛细管冷冻精液的生产流程包括：采精→稀释→降温平衡→分装封口打印→冷冻→贮存→分送出站。
基层单位取用颗粒冻精和细管冻精，原则上应使用专用的液氮罐贮存和运送。液氮罐酷似日常生活中使用的热水瓶，它的设计主要保证绝缘和真空，以便减少液氮的挥发。但液氮总是要气化的。因此，经过一段时间，必须向液氮罐添加液氮，使存放于罐内的冻精沉浸其中，确保冻精处于超低温状态。
（四）授精的技术操作规程
1．母牛的准备将待配母牛进行保定（为了防止在操作中母牛骚动，可在鬐胛部设攀压带），把尾系于一侧，用0.1%高锰酸钾溶液洗涤阴户及其周围，抹干，再用消毒干棉球将母牛阴户揩干。2．授精器械的准备
输精管（枪）每次使用后都应用碱水或洗衣粉水洗涤，清水冲洗干净，再用酒精消毒后放入盘中，用纱布盖上备用。临用前用冷开水冲洗数遍，再用1%氯化钠溶液或2.9%柠檬酸钠溶液冲洗数遍。3．冻精的准备
按冷冻精液的使用方法准备稳妥。4．授精的技术操作
湖北省推行直肠把握子宫颈输精法。
直肠把握法也称作深部输精法。输精人员的手插入母牛的直肠，通过直肠把握固定好子宫颈，另一只手将盛有精液的输精器经母牛阴道，插入到子宫颈深处或子宫颈内口注入精液。它是人工授精操作的最后一个步骤，也是一个重要的环节。（1）授精之前将伸入直肠的手及手臂用肥皂滑润，手呈楔形插入母牛直肠，触摸子宫、卵巢、子宫颈的位置，并令母牛排除蓄粪。（2）固定子宫颈。
①用在直肠内的整个手掌和手指把握住子宫颈。用手指的肉部使劲，牢牢地抓住子宫颈。手不应靠前，应牢牢地握在子宫颈的后部，以小指恰好在子宫颈口附近为适宜。
②将伸入直肠内手的食指和中指牢牢地钳住子宫颈，拇指的肉部抵在子宫颈口处。子宫颈被牢牢固定后，伸入直肠的手臂稍稍用力下压，便于阴门裂开以利于插入输精器。
③当母牛努责难于用以上两种方法握住子宫颈时，可将手指并拢将子宫颈压于耻骨体上或骨盆腔侧壁之固定。在遇到直肠形成罐状时，也可采用这种方法。
若母牛努责过甚，可采用喂给饲草、捏腰、拍打眼睛、按摩阴蒂等方法使之缓解。若母牛直肠呈罐状时，可用手臂在直肠中前后抽动以促使松弛。（3）输精器插入子宫颈外口。
①手把握好子宫颈，大拇指肚按压子宫颈外口上缘，另一只手持输精器通过阴道，探索抵达拇指肚，再导入子宫颈外口内。
②手攥握子宫颈，另一只手持输精器沿手臂，向手心中探插，输精器可进入子宫颈外口。（4）输精器通过子宫颈管，抵达子宫体，进入子宫颈外口的输精器，才能通过子宫颈，因此成为输精操作最为困难的部位。操作时两手需作很好的配合，将输精器顺利地通过子宫颈管的几个皱襞，进入到子宫体部位。具体方法是：一只手拳握攥住子宫颈，另一只手持已进入子宫颈外口的输精器多处转换方向，向前探插，同时用拳握攥住子宫颈的手将子宫颈前段稍作抬高，并向输精器上套。输精器通过子宫颈管内的硬皱襞时，会有明显的感觉。当输精器一旦越过子宫颈皱襞，立刻感到畅通无阻，这时即抵达子宫体处。当输精器处在子宫颈管内时，手指是摸不到的，输精器一进入子宫体，即可很清楚地触摸到输精器的前段。（5）注入精液，取出输精器。当确认输精器进入子宫体时，应向后抽退一点，勿使子宫壁堵塞住输精器尖端出口处，缓慢地、顺利地将精液注入，然后轻轻地抽出输精器。5．授精的注意事项
授精过程必须按照操作程序有条不紊地进行，做好消毒工作，注意保持精液的纯净及精子活力良好，将精液注入规定位置，避免精液流失。操作过程中要注意人畜安全，防止损坏器械，不得损伤母牛阴道及直肠壁。要注意避开水及温度对精子的影响，晴天避免阳光直接照射精液，气温低于20℃时应注意精液的保温，吸取精液的输精器应温暖，授精操作要求轻缓，尽可能减少对母牛的刺激。授精完毕要及时填写记录表格，清洗授精器械。授精后发现精液流失，精子死亡等，应进行补授或重授。授精以后不应忘记嘱咐畜主继续观察母牛，如发现在6小时内仍有发情症状，应进行重复授精。
（五）冷冻精液的使用
1．细管冷冻精液的使用细管冷冻精液有许多优点。因为细管冷冻精液采用机械化、半自动化和自动化生产，卫生条件好，容易标记不易混淆，而且能提高一次采精所得精液的头剂量。细管冷冻精液解冻方便快捷，不需要解冻液，使用专用输精枪授精，操作方便，受胎效果良好。
细管冷冻精液是在使用之前解冻，解冻以后要求尽快输精。解冻时用容器盛40℃的温水→用镊子夹取细管冷冻精液管直接投入→摇动20秒钟融冻→用干纱布擦干→剪开封口端→将细管填入输精枪内输精。
解冻后的细管冷冻精液，剪开封口后输精前可以检查精子活力；也可在输精完毕后检查细管中残留精液的精子活力。
细管冷冻精液打印有公牛和冷冻精液的资料，输精完毕可作为授精记录表格的登记凭证。2．颗粒冷冻精液的使用
颗粒冷冻精液制作时使用的冷冻稀释液含有增强抗冻能力的甘油，去除稀释液中含有的电解质成分。在使用前，即在颗粒解冻时，再将稀释液中含有的电解质成分导入。因此常用解冻液解冻颗粒冻精。12通常采用的单方解冻液是2.9%柠檬酸钠溶液和维生素B。
颗粒冻精在使用前解冻，解冻以后尽快授精。解冻时可采用消过毒的青霉素小瓶，也可采用小试管。解冻程序是：用解冻液冲洗青霉素小瓶2～3次→向瓶内注入解冻液0.8毫升→置于40℃的温水中浸泡3～5分钟升温→将消毒干燥的镊子或耙子在液氮罐颈部预冷2～3分钟→夹取颗粒冻精1～2粒迅速而准确地投入小瓶中立即摇动→颗粒融冻立即取出小瓶置于室温下→用消毒玻棒取精液一滴滴于温暖的载玻片上在40℃显微镜保温箱内镜检精子活力，活力在0.3以上立即应用。
解冻颗粒冻精要求快、稳、准。严格操作程序，不能疏忽大意，否则将造成严重后果。特别要注意液氮罐中贮存的颗粒冻精，避免在取用冻精颗粒时升温（即使是短时的升温），造成损害。
（六）精液品质的检查
在对精液品质进行检查时，必须准备以下器具：显微镜、显微镜保温箱（或显微镜恒温台）、载玻片、盖玻片、搪瓷盘、温度计、滴管、擦镜纸、纱布、蒸馏水、3%和0.9%氯化钠溶液、2%煤酚皂溶液、1/1000新洁尔灭溶液、75%酒精等。1．精子活率评定（1）细管型冷冻精液在输精完毕后，将细管中残留精液用压片法立即在150～600倍显微镜下检查。（2）颗粒型冷冻精液应先取2.9%柠檬酸钠溶液1～1.5毫升，加温到38 ± 2℃，投入颗粒冷冻精液一粒，轻轻摇荡，当溶化尚余1/2～1/3时，脱离加温使其在外界温度下溶化，用压片法立即在150～600倍显微镜下检查。（3）检查精子活率用的显微镜载物台应保持35～38℃温度。（4）在显微镜视野下，呈直线前进运动的精子数占全部精子数的百分率来评定精子活率。100%的精子呈直线前进运动者评为1.0,90%的精子呈直线前进运动者评为0.9。以此类推。2．精子数标准
每头份冷冻精液的直线前进运动精子数必须达到以下标准：
黄牛：细管型1000万个以上/支
颗粒型1000万个以上/粒
水牛：细管型1200万个以上/支
颗粒型1200万个以上/粒
采用姬姆萨染色法作显微镜观察或用干扰相差显微镜观察。每个样品应观察精子总数500个。解冻后精子顶体完整率不得低于40%。
（七）母牛生殖器官的检查
1．检查前的准备工作（1）将受检母畜保定于六柱栏内，防止检查人员被踢伤。（2）为了避免肠胃中内容物过多时妨碍操作，可事前禁食半天，或临检查时用温水灌肠。（3）剪短指甲并挫圆，在手臂上涂以肥皂以便滑润，便于通过肛门。（4）将受检母畜的尾巴拉向一侧。2．检查方法（1）直肠检查法的操作要点。①将被检母畜保定在六柱栏内，或用绳索保定亦可。将绳索的一端套系于被检母畜的颈部，然后使绳索通过后肢胫后关节之上，另一端打活结拴系于颈部绳环上。
②助手将被检母畜的尾巴拉向一侧。
③检查者将衣袖挽至肩关节处，带上长臂手套或在手臂上涂以滑润剂。
④检查者站立于被检母牛正后方，给母畜的肛门周围涂以较多滑润剂，并抚摸肛门。
⑤检查者将手指并拢成楔状，缓缓地旋转动作插入肛门。对于体型较小的母畜掌心应朝向一侧，以便进入肛门，因为尾椎上下活动的范围较大，而左右横径由于坐骨粗隆的限制，不便扩张。
⑥手臂伸入肛门后，直肠内如有蓄粪，可用手指扩张肛门，使空气由指缝进入直肠内，促使蓄粪排出。否则再以手指掏出。掏出粪便时，手掌须展平，少量而多数地取出，切勿抓粪一把，向外硬拉。最好设法促使母畜自动排粪。其方法是将手掌在直肠内向前轻推，以阻止粪便排出，待粪便蓄积较多时，逐渐撤出手臂，即可促使排尽蓄粪。
⑦掏取粪便后，应当再次向手臂涂以滑润剂，伸入直肠，除拇指外，将四指并拢探入结肠内，即可探查欲检查器官。
在直肠检查过程中，往往遇到以下几种情况，应注意正确处理。
①当母畜出现强烈努责时，将手臂向外排挤，手臂切忌用力硬推，否则易造成肠壁穿孔。因努责影响操作时可采用手指掐捏、压迫母畜的腰部，或抚摸阴蒂，或抓提膝部皮肤皱襞，或喂给饲料，以减弱或停止努责。
②结肠及直肠持续收缩，肠壁紧套于检查者手臂上，但并不向外挤压，致使手臂无法自如地探摸，此时也可采用上述制止努责的方法，促使肠壁停止收缩。
③直肠壁绷硬，向骨盆腔周围膨起呈坛状，手掌在直肠内拍打时，可以听到瓷坛声。遇此状态，可将手指聚拢成锥状，缓缓地向前推进，刺激结肠的蠕动后移，以促使直肠壁舒展变软。如果上述措施无效，只有耐心等待，使其自行舒展后，再行探摸触诊。（2）母牛生殖器官检查法。
①检查者手指合拢成楔状，缓慢地以旋转动作插入肛门并逐渐进入直肠。
②直肠内如有宿粪，应分次少量地掏出。
③当手腕进入母畜肛门后应先寻找子宫颈。手指向下轻压肠壁，摸到一个坚实的纵向似棒状物即为子宫颈，可用拇指、中指及无名指来握住子宫颈。
④沿子宫角的弯曲部（大弯）向外侧下行，在子宫角尖端的外侧下方即可感触到呈椭圆形柔软有弹性的卵巢，然后判定其形状和质地。
⑤在触摸过程中如失去子宫角不易摸到卵巢时，最好再从子宫颈开始沿着子宫角触摸卵巢。（3）母牛子宫检查法。当手腕伸入直肠后，在手心下面即可摸到坚实的子宫颈。将食指、中指和无名指贴在子宫颈上向前摸索，在子宫体前方，用食指和无名指可摸到两个圆柱形并向前弯曲的子宫角，中指则可以感到两子宫角之间的凹沟即角间沟。仔细体会呈绵羊角弯曲的两子宫角形状，触摸其大小、硬度及位置。（4）母牛髂内动脉的触摸方法。手臂伸入母牛直肠内，手心向上，中指紧贴椎体向前移行，当其位置下移即达到最后一个腰椎时，感到有一向下凸起的岬部，沿腰椎体前移约2厘米处，有一对腹主动脉的最后分支，贴着骨盆向后侧方走向，即为髂内动脉。
母牛的子宫动脉和脐动脉（出生前）共同起于髂内动脉。在母牛未孕时或妊娠3个月以前的子宫动脉还很细，也不呈现有特殊的妊娠脉搏，因此通过直肠检查是摸不到的。当妊娠4个月以后，就可以从髂内动脉上摸到一条沿着子宫阔韧带向下走向，呈游离状分布到子宫角的子宫动脉。妊娠后的子宫动脉，由于供应子宫的血量增加，在3个半月以后触摸时感到明显地增粗，同时出现有特殊的妊娠脉搏，血流摩擦血管壁的波动感逐日显著。
（八）母牛的发情检查
1．母牛的发情和排卵母牛在正常情况下，每隔18～24天出现一次发情和排卵。母牛发情时表现兴奋不安、生殖器官充血肿胀，接受交配，生殖道排出黏液，卵巢上卵泡发育并排卵。母牛之所以表现周期性的发情和排卵，是由卵巢的生理状态决定的。在卵泡期，母牛发情和排卵；在黄体期，母牛不表现发情症状。在人为干预的情况下，母牛卵巢可以表现出卵泡期或黄体期，即所谓人工控制发情和排卵，人工控制性周期。
根据母牛卵巢的生理状态，可将母牛的发情周期划分为发情前期、发情期、发情后期和间情期。受季节和饲养管理条件的影响，在一定条件下，母牛不表现发情，我们称之为乏情期。当母牛怀孕时，也出现乏情期。
母牛的排卵是自发的，在激素的刺激下即使不经过交配都能排卵。母牛排出的卵子在输卵管壶腹部才具有受精能力。人工授精特别是冷冻精液人工授精，确定比较准确的排卵时间是配种成功的必具条件。
从冻精授精的实际需要出发，我们将母牛的发情期分为发情初期、发情盛期和发情末期。排卵发生在发情结束后，因此正确地判定发情末期是冻精授精成功的关键之一。母黄牛发情期三期表现见下表。2．母牛的发情和排卵检查
对母牛进行发情和排卵检查采用试、问、看、查、摸的综合诊断法。根据所得结果进行综合判断，确定适宜的冻配时间。
试：采用结扎输精管的公牛作试情牛。观察母牛是否存在交配欲，是否抗拒试情牛或回避试情牛，观察试情公牛是否紧追母牛不舍，是否爬跨交配，等等。母黄牛发情期三期的表现
问：询问畜主的母牛的表现。是否兴奋哞叫，是否不好管理，是否到处游走，有无其他牛追爬，母牛被爬跨时有何表现，是否举尾频尿，阴门有否黏液流出，其性状如何，等等。
看：看母牛全身兴奋状况。看有无被其他牛爬跨留下的痕迹。看有无黏液或黏液痂块等等。
查：用消毒的开膣器或玻璃阴道扩张筒，开张阴道，观察阴道的颜色、润滑度、潮湿度，观察子宫颈口的颜色、开张度、形状、子宫颈口附着黏液的多少、性状、色泽。将开膣器插入阴道，其插入难易应最先注意和感知。在开膣检查时，可结合采集子宫颈口黏液做抹片，自然干燥后在显微镜下用低倍镜头观察黏液结晶的形状。
摸：直肠检查从极易识别的子宫颈向前抚摸。感知子宫颈、子宫角及卵巢的位置。注意子宫有无收缩反应，子宫角间沟是否明显，两侧子宫角是否匀称，卵巢的形状、大小、质地如何。仔细触摸卵巢，一侧一侧地抚摸。感知卵巢上有无卵泡，卵泡的大小、质地、位置所在。卵巢上有无黄体，黄体的大小、形状、质地、位置，等等。3．发情母畜的外部观察和阴道检查（1）发情母畜的外部表现。母牛发情表现不安、哞叫、食欲和奶量都减少，尾巴不时摇摆和高举，放牧时通常不安宁吃草而到处走动。明显的特征是接受其他母牛的爬跨，表现为拱腰站立不动，其他母牛常去嗅闻发情母牛的阴门，但发情母牛从不去嗅闻其他母牛的阴门。阴道排出蛋清样的黏液，打开阴道会有大量的黏液从开膣器中滴溜垂落地下。发情排卵过的母牛常会看到从生殖道内排出带有血液的黏液。（2）阴道检查。
①开膣器法
A．检查前的准备工作。
保定：根据现场条件和习惯，利用绳索，三角绊或六柱栏保定母畜，并将尾毛理齐由一侧拉向前方。
外阴部的洗涤和消毒：先用清水（或肥皂水、2%～3%苏打水等）洗净外阴部，然后用1%煤酚皂或1/1000新洁尔灭溶液进行消毒，最后用消毒纱布或酒精棉球擦干。
在洗净或消毒时，应先向阴门裂开始，逐渐向外扩大。如果准备用手臂检查，洗涤及消毒范围应该上至尾根、两侧达到臀端外侧。
开膣器的准备：先用75%的酒精棉球消毒开膣器的内外面，然后用火焰烧灼消毒，亦可用消毒液浸泡消毒，然后用开水冲去药液，借其湿润时使用之。
B．方法步骤。
用左手拇指和食指（或中指）开张阴门，以右手持开膣器把柄，使闭合的开膣器和阴门相适应，斜向前上方插入阴门。
当开膣器的前1/3进入后，即改成水平方向插入阴道，同时，旋转开膣器，使其把柄向下。
轻轻撑开阴道，用手电筒或反光镜照明阴道，迅速进行观察。
观察阴道。应特别注意阴道黏膜的色泽及湿润程度，子宫颈部的颜色及形状，黏液的量、黏度和气味，以及子宫颈管是否开张及开张程度。
母畜发情时可见阴唇肿大，开膣器容易插入。阴道黏膜充血，光泽滑润、子宫颈口松软而开张，有黏液流出。
当母畜未发情时，阴门紧缩，并有皱纹。开膣器插入时有干涩的感觉，阴道黏膜苍白，黏液呈糨糊状或很少，子宫颈口紧缩。
②黏液抹片法。
A．用经消毒的开膣器扩张阴道。
B．用生理盐水浸湿的消毒棉签插入阴道，在子宫颈外口蘸取阴道黏液。
C．将蘸取的黏液均匀地涂抹于载玻片上，待自然干燥后，在显3微镜下观察结晶花纹。也可用10% AgNO溶液1～2滴，滴在载玻片上，待自然干燥后，镜检。牛的黏液抹片可放大到100～200倍，羊的黏液抹片可放大到250～400倍进行观察。
D．黏液抹片无花纹时显示受检母畜不发情，以“-”记录。母畜开始发情时，黏液抹片呈少量树枝状花纹，以“+”记录。抹片呈现较多花纹时“+ +”记录。如果整个视野全部为结晶花纹时，以“+ + +”记录，表示母畜正处在发情盛期。
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